摘要目的:<br> 口腔白斑(oralleukoplakia,OLK)属于口腔癌前病变,易癌变,目前缺乏理想的治疗方案。半枝莲(ScutellariabarbataD.Don,SB)是一种常见中药,具有抗癌、抗炎及免疫调节等作用,但对OLK的作用尚不清楚,因此,本文通过网络药理学和分子对接方法研究SB抗OLK的作用,并通过体外CCK8和流式细胞术实验验证SB核心成分对OLK细胞周期和凋亡的作用,对网络药理学研究的结果进行进一步的证实。<br> 方法:<br> 第一部分:数据库分析半枝莲作用的成分、靶点及通路<br> TCMSP和Uniprot数据库获得SB主要成分和相关靶点;OMIM和GeneCards数据库筛选OLK相关靶点;在线韦恩图Venny2.1.0获取SB-OLK交集靶点,并绘制交集靶点的PPI网络图筛选关键靶点、“SB-成分-交集靶点-OLK”关系网络图筛选核心成分,Metascape数据库进行基因本体论功能(GO)和基因组百科全书通路(KEGG),并筛选核心通路;最后通过分子对接技术验证。<br> 第二部分:细胞实验研究槲皮素对口腔白斑细胞的作用<br> 选取口腔白斑细胞(DOK细胞)和人正常口腔黏膜角质形成细胞(HOK细胞),CCK-8实验检测槲皮素对两种细胞细胞毒性的影响、作用的不同浓度及细胞增殖的影响;流式细胞术检测槲皮素对细胞周期和凋亡的影响,最后进行统计学分析。<br> 结果:<br> 第一部分:网络药理学结果<br> 通过网络药理学分析得到SB作用于OLK的主要成分有29个,核心成分为槲皮素,交集靶点33个,关键靶点为ESR1、CCND1、MYC、EGFR和CASP3;GO功能分析共涉及到769种生物功能,包括702种生物过程,24种细胞成分,43种分子功能,主要影响细胞凋亡、转录和应激反应等;KEGG分析检索出20条信号转导通路,p53信号通路为关键;分子对接技术提示关键靶点与槲皮素结合良好。<br> 第二部分:细胞实验结果<br> 细胞学实验提示槲皮素均抑制DOK和HOK细胞活力从而抑制细胞增殖,当浓度lt;100μM时对HOK细胞活力无明显影响,对DOK细胞的抑制作用呈时间和浓度依赖性;槲皮素可明显阻滞DOK细胞周期S期,而对HOK细胞S期的影响在实验组间比较差异无统计学意义;槲皮素可促进DOK细胞的凋亡,对HOK细胞无明显影响。<br> 结论:<br> 1.半枝莲对口腔白斑作用的核心成分为槲皮素,关键靶点为ESR1、CCND1、MYC、EGFR和CASP3,与槲皮素结合良好,关键信号通路为p53信号通路。<br> 2.体外细胞实验发现槲皮素抑制DOK细胞的增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡,为临床应用半枝莲治疗口腔白斑提供了理论依据。
更多相关知识
- 浏览3
- 被引1
- 下载9
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文