检索历史 清除

摘要目的：<br>　　观察泽布替尼（BGB-3111）、伊马替尼（IM）对人费城染色体阳性急性B淋巴细胞白血病细胞SUP-B15细胞株增殖、凋亡的影响情况，寻找可能的作用机制，为临床应用提供新的理论基础。<br>　　方法：<br>　　1.使用MTT法测定BGB-3111、IM单药及两药联合作用于SUP-B15细胞24h、48h、72h，观察其增殖抑制情况。<br>　　2.流式细胞仪检测BGB-3111、IM单药及两药联合作用于SUP-B15细胞株48h，观察其凋亡情况。<br>　　3.在48h时间点，BGB-3111、IM单药及两药联合作用于SUP-B15细胞株后，采用q-PCR检测的BCR-ABL、BTK、AKTmRNA表达。<br>　　4.在48h时间点，BGB-3111、IM单药及两药联合作用于SUP-B15细胞株后，采用Westernblot检测BCR-ABL、BTK、P-AKT、AKT等蛋白表达水平。<br>　　结果：<br>　　1.MTT法结果示：随着BGB-3111、IM作用于细胞的时间延长、浓度增加，细胞的增殖抑制率增高，存在剂量-时间依赖性。差异有统计学意义。通过金氏公式计算，2.5μmol/LBGB-3111联合10μmol/LIM、10μmol/LBGB-3111联合5μmol/LIM、10μmol/LBGB-3111联合10μmol/LIM在24h和48h协同指数均大于1.15，其中10μmol/LBGB-3111联合5μmol/LIM在48h时，协同作用为1.23gt;1.15,协同作用最强。结果示：BGB-3111和IM对SUP-B15细胞有协同增殖抑制作用。<br>　　2.流式细胞术结果显示：对照组平均凋亡率（1.51±0.87）%，BGB-3111（10μmol/L）组平均凋亡率为（8.05±2.02）%，IM（5μmol/L）单药组平均凋亡率（12.07±2.86）%，两药联合组（10μmol/LBGB-3111联合5μmol/LIM）平均凋亡率为（26.11±2.78）%。由此可见，两药联合的凋亡率大于单药组和对照组（Plt;0.05）。得出结论，BGB-3111和IM联用诱导细胞凋亡率高于各个单药组，且以早期凋亡为主。<br>　　3.qPCR法结果显示：BGB-3111（10μmol/L）单药组和IM（5μmol/L）单药组以及两药联合组作用于SUP-B15细胞株48h后，BCR-ABL、AKT、BTKmRNA的表达水平较对照组相比均明显下降，并且两药联合组AKTmRNA的表达显著低于各单药组。<br>　　4.Westernblot显示：BGB-3111（10μmol/L）单药组和IM（5μmol/L）单药组以及两药联合组作用于SUP-B15细胞株48h后，BCR-ABL、P-AKT、AKT、BTK蛋白的表达水平较对照组相比均下降，并且两药联合组P-AKT、AKT蛋白的表达低于各单药组，差异有统计学意义（Plt;0.05）。<br>　　结论：<br>　　BGB-3111、IM单药及两药联合作用于SUP-B15细胞株，对其有抑制增殖、诱导凋亡作用，考虑有协同作用，可能与BGB-3111和IM通过抑制BCR信号通路上的关键激酶BTK、BCR-ABL等，进一步协同抑制下游PI3K/AKT信号通路有关。