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摘要组蛋白甲基化修饰是组蛋白修饰中最常见的化学修饰。赖氨酸特异性去甲基化酶5D（Kdm5d）作为KDM家族的一员，是一种位于Y染色体上的特异性组蛋白去甲基化酶，其作为一种组蛋白甲基化的标记，一旦发生缺失，会改变基因的表达，从而参与多种生物学过程。睾丸间充质细胞是睾酮的主要来源，睾酮可以调节血液中睾丸屏障的形成、减数分裂、精子的发生和精子受精。有报道表明，在双氢睾酮存在下，前列腺癌细胞（LNCap）中KDM5D表达下调导致多西他赛耐药。KDM5D在细胞核内可以与雄激素受体发生物理作用，通过去除H3K4me3的活性转录标记来调控其转录活性，减弱Kdm5d表达从而导致AR信号失调。本论文在前期研究的基础上，对Kdm5d在小鼠睾丸间充质细胞中的调控机制进行探究。<br>　　首先，本研究对小鼠睾丸间充质TM3细胞和敲除Kdm5d稳转细胞系（Kdm5d-KO）进行RNA-Seq测序，通过测序分析筛选出195个上调表达和155个下调表达的基因，将这350个差异表达基因进行GO和KEGG的通路富集分析，富集到的信号通路与雄激素分泌有关、上皮-间质转化以及血管形成有关。接着通过RT-PCR实验对筛选的与雄激素分泌相关的9个差异基因Adgrg1、Tgfbr1、Nupr、Eif2s2、Ddx3y、Akap9、FGF7、Cxcl5、Sema3c进行了验证，结果显示其表达差异与RNA-Seq高通量数据分析的趋势基本一致。最后选取在Kdm5d敲除细胞系中显著下调的Ddx3y为研究对象，通过构建Ddx3y的过表达载体，将其转染到TM3细胞和Kdm5d-KO中，RT-PCR及Western blot结果显示Ddx3y过表达载体构建成功；并将GV230-Ddx3y转染到Kdm5d-KO细胞系中，结果显示，Ddx3y上调可以促进细胞增殖，而对细胞周期和凋亡没有明显影响。<br>　　综上，本论文通过高通量RNA-seq数据分析筛选出Kdm5d表达调控的差异基因并对其参与的信号通路进行富集；并在敲除细胞系中对Kdm5d敲除后显著差异表达的Ddx3y基因进行过表达，其影响睾丸间质细胞的增殖，为后续深入研究Kdm5d在睾丸间质细胞中的调控机制奠定了基础。