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摘要矮生二裂委陵菜（Potentilla bifurca var.Humilior R.）是委陵菜属（Potentilla）植物二裂委陵菜的一个变种，主要含有黄酮类、多糖类、鞣质类等多种活性成分，可用于抗肿瘤、抗病毒、抗高血糖等症。本研究基于课题组分离得到的28个化合物，经实验前期筛选出7个活性化合物，通过网络药理学预测、DPP-4酶反应、糖酵解途径及PI3K-AKT信号通路探究矮生二裂委陵菜7个化合物对胰岛素抵抗的改善作用。<br>　　1.利用网络药理学对QC3G(Quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside)、MC(Myricetin)，QC3X(Quercetin-3-O-β-D-xylose)，QC3GP(Quercetin-3-O-(6''''-O-trans-p-coumaroyl)-β-D-glucoside)，QC(Quercetin)，EC((-)-epicatechin)，CG(1-O-coumaroyl-β-D-glucose)进行了疾病靶点预测，并筛选出矮生二裂委陵菜7个化合物32个潜在靶点。经过KEGG通路分析共得到矮生二裂委陵菜改善糖尿病可能通路19个。利用化合物-靶点-通路网络图分析，矮生二裂委陵菜19个通路中PI3K-AKT信号通路节点最大，与糖尿病疾病关联性较强。<br>　　2.建立DPP-4酶反应体系，测定了矮生二裂委陵菜化合物对DPP-4抑制活性。其中化合物MC、QC、QC3X、QC3G、QC3GP随着浓度的增加，对DPP-4酶抑制活性逐渐增强。通过对筛选出来的5个活性化合物进行测定，结果表明这5个都是竞争性抑制剂。<br>　　3.对胰岛素抵抗模型建立过程中的胰岛素浓度、作用时间及稳定性进行了考察。结果表明10-8μmol·L-1的胰岛素作用HepG2细胞48h能达到IR状态，且这种IR状态能在建模后的48h内保持稳定。细胞毒性试验结果表明，当化合物浓度在100μmol·L-1时，化合物MC、EC、QC3G、QC3GP及CG组细胞活力低于90%；当化合物浓度在1μmol·L-1和10μmol·L-1时，各组细胞活力均大于100%。<br>　　4.对IR-HepG2细胞糖酵解途径中的糖消耗量、丙酮酸激酶活力及己糖激酶活力进行测定。与模型组相比：化合物EC、QC3X及QC3G改善糖消耗量显著（P＜0.01，P＜0.05），化合物MC、QC、QC3GP及CG改善IR-HepG2细胞中丙酮酸激酶活力显著（P＜0.01，P＜0.05），化合物MC、QC3G、CG改善IR-HepG2细胞中己糖激酶活力显著（P＜0.01，P＜0.05）。<br>　　5.用ELISA试剂盒对PI3K-AKT信号通路中PI3K、AKT、GLUT2蛋白的含量进行测定。与模型组相比结果表明：化合物MC、EC、QC、QC3X、QC3G改善IR-HepG2细胞中PI3K含量极显著（P＜0.01），化合物MC、EC、QC、QC3X、QC3G、QC3GP、CG改善IR-HepG2细胞中AKT的含量极显著（P＜0.01），化合物MC、QC3X、QC3GP、QC改善IR-HepG2细胞中GLUT2含量差异显著（P＜0.01，P＜0.05）。<br>　　综上所述，矮生二裂委陵菜化合物能通过抑制DPP-4酶活性、改善糖酵解途径中的丙酮酸激酶和己糖激酶活力及调控PI3K-AKT信号通路来改善胰岛素抵抗，从而达到治疗2型糖尿病的效果。