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摘要【背景和目的】<br>　　microRNA-221-3p（miR-221-3p）和microRNA-222-3p（miR-222-3p）均为小分子非编码RNA，能在转录后水平调控靶基因信使RNA（messengerRNA，mRNA）的翻译，调节蛋白质的合成，两者均定位于X染色体，拥有相同的转录本和种子序列，具有高度同源性。最近的研究证实，miR-221/222-3p的异常表达与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关，并且在乳腺癌中也起到促进肿瘤生长和侵袭的作用，但其作用机制以及临床意义仍需进一步研究。在本研究中我们探索miRNA-221-3p/222-3p在乳腺癌中的表达与临床病理特征的相关性和诊断价值，以及通过公共数据库分析其预后价值。基于生物信息学预测其下游的靶基因和信号通路，为乳癌的诊断、预后预测提供潜在的分子标记物和治疗靶点，并为其在乳腺癌进展中的作用机制提供理论基础。<br>　　【材料和方法】<br>　　选取汕头大学医学院附属肿瘤医院乳腺中心2019年1月至2021年5月的70名女性乳腺癌患者的癌组织和匹配的癌旁组织，通过实时荧光定量PCR（quantitativereal-timePCR，qRT-PCR）检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-221/222-3p的表达水平，并分析miR-221/222-3p的表达与临床病理特征之间的相关性；通过受试者工作特征（receiveroperatingcharacteristic，ROC）曲线评估其诊断价值；通过分析来自癌症基因组图谱数据库（TheCancerGenomeAtlas,TCGA）的766例乳腺癌患者数据，绘制Kaplan-Meier曲线和通过Cox回归分析，分析其在预测预后的价值。通过网络数据库预测miR-221/222-3p的下游靶基因，并对靶基因进行基因本体论（GeneOntology，GO）和京都基因和基因组百科全书（KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes，KEGG）通路富集分析，以预测参与乳腺癌进展的潜在信号通路。随后，将靶基因上传到Metascape以进一步构建蛋白质相互作用（protein-proteininteraction，PPI）网络并筛选与miR-221/222-3p相互作用关系最强的关键基因。<br>　　【结果】<br>　　miR-221-3p在乳腺癌组织中表达水平显著高于配对癌旁组织（3.09±5.17VS1.00,p=0.038），miR-222-3p在乳腺癌组织的表达相对癌旁组织有升高趋势，但差异无统计学意义（2.19±3.60VS1.00，p=0.860）。miR-221/222-3p在三阴性乳腺癌（triple-negativebreastcancer，TNBC）组织中表达水平均显著高于其他分子分型乳腺癌（p＜0.05）。miR-221-3p的在雌激素受体（estrogenreceptor，ER）阴性和孕激素受体（progesteronereceptor，PR）阴性的乳腺癌中表达水平均显著高于阳性表达组（5.82±6.98VS1.93±3.68，p=0.003；4.90±6.55VS2.02±3.85，p=0.022），miR-222-3p的在ER阴性和PR阴性的乳腺癌中表达水平也显著高于阳性组（4.86±5.19VS1.04±1.73，p＜0.001；4.02±4.97VS1.10±1.81，p=0.009）。miR-221/222-3p表达水平与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、ki67表达、肿瘤的分期无相关性（p＞0.05）。通过ROC曲线分析，miR-221-3p的AUC为0.799，在截断值为12.89时，敏感性为91.7%，特异性为66.7%（p=0.013）；miR-222-3p的AUC为0.764，截断值为12.02时敏感性为83.3%，特异性为75.0%（p=0.028），结果显示miR-221/222-3p对TNBC具有诊断价值。生存分析结果显示miR-221-3p高表达组的5年OS、DFS均低于低表达组（75.9%VS84.4%，HR=2.08，p=0.037；73.6%VS83.4%，HR=2.07，p=0.039）；miRNA-222-3p高表达组的5年OS、DFS均显著低于低表达组（72.5%VS84.5%，HR=3.48，p=0.002；68.3%VS83.8%，HR=2.33，p=0.003）。Cox回归分析显示miR-221/222-3p的高表达是乳腺癌不良预后的独立因素。通过对靶基因进行GO和KEGG通路富集分析表明，miR221/222-3p参与MAPK信号通路调控乳腺癌的发生和发展。基于PPI网络筛选的与miR-221/222-3p相互作用关系最强的前10个关键靶基因为FOS、CDKN1B、CTCF、ETS1、BCL2L11、DICER1、TCF12、KPNA2、ARID1A、YWHAG。<br>　　【结论】<br>　　（1）miR-221-3p在乳腺癌组织表达显著增高于癌旁组织；<br>　　（2）miR-221/222-3p在ER、PR阴性乳腺癌和TNBC中表达水平显著增高，可作为TNBC潜在的诊断标志物；<br>　　（3）miR221/222-3p的高表达与乳腺癌的不良预后相关，可作为预测乳腺癌不良预后的因素；<br>　　（4）基于生物信息学预测的关键靶基因和MAPK信号通路可能是miR-221/222-3p参与调控乳腺癌进展的潜在机制。需要进一步通过实验探索它们在乳腺癌中的作用机制。<br>　　（5）miR-221/222-3p与关键靶基因FOS、CDKN1B、CTCF、ETS1、BCL2L11、DICER1、TCF12、KPNA2、ARID1A、YWHAG可能存在相互作用关系。