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摘要目的：<br>　　探讨实体瘤微环境中是否存在抑制CD8+T细胞增殖和功能的TDSFs；筛选并验证肿瘤微环境中的关键TDSFs；分析CST2在肿瘤患者预后中的作用<br>　　方法：<br>　　（1）通过EasySepMousePan-NaiveTCellIsolationKit磁珠分选获取小鼠脾脏中的Na?veT细胞，以及CD3/28体外刺激NaiveT细胞的增殖与活化。<br>　　（2）通过流式细胞术和CFSE活细胞荧光标记，对比在完全培养基(completemedium,CM)和多个癌种肿瘤条件培养基(tumorconditionedmedium,TCM)培养下，CD8+T细胞的增殖(标记荧光的稀释信号)以及功能分子(GranzymeB和IFN-γ)的差异。<br>　　（3）研究基于生物信息学分析大数据，TCGA数据库提取乳腺癌，结肠癌和皮肤癌原始mRNA的表达处理数据，下载分泌蛋白数据集，差异分析获取肿瘤中高表达的分泌蛋白基因。<br>　　（4）通过q-PCR验证差异基因在乳腺癌，结肠癌和黑色素瘤细胞水平的表达。<br>　　（5）通过K-M生存分析和Western-Blot在肿瘤患者中探讨能做为预后标记物的关键基因。<br>　　结果：<br>　　（1）与CM培养组相比，TCM培养组的CD8+T细胞未观察到明显的CFSE荧光稀释信号，且MFI显著升高（p＜0.05），提示肿瘤细胞培养上清中存在明显抑制T细胞增殖的分泌因子<br>　　（2）与CM培养组相比，TCM培养组CD8+T的GranzymeB和IFN-γ表达量显著降低(p＜0.05)，表明肿瘤细胞培养上清中存在显著抑制CD8+T细胞功能的分泌因子。<br>　　（3）通过差异分析，在乳腺癌，结肠癌和皮肤癌中筛选获得13个显著高表达的分泌蛋白基因，分别是SPP1、ESM1、LRP8、NXPH1、MMP10、MMP1、ADAMTS20、CCL25、GDF15、CST2、BPIFB1、R3HDML、MMP11。<br>　　（4）通过q-PCR与正常乳腺上皮细胞相比，在MDA231,MCF-7,ZR7530,T47D,BT549乳腺癌细胞系中，上述基因均显著高表达。<br>　　（5）通过K-M生存分析和Western-Blot，CST2能做为预测肿瘤患者预后生存的生物标记物。<br>　　结论：<br>　　实体瘤中存在显著抑制CD8+T细胞增殖和功能的TDSFs，在TME中肿瘤细胞能通过产生TDSFs抑制CD8+T细胞的增殖和活化。通过生信挖掘和q-PCR验证，在癌症患者中中，存在SPP1、ESM1、LRP8、NXPH1、MMP10、MMP1、ADAMTS20、CCL25、GDF15、CST2、BPIFB1、R3HDML、MMP11等13个显著高表达的分泌蛋白基因。CST2能做为预测肿瘤患者预后生存的生物标记物。