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摘要研究背景和目的：<br>　　骨性关节炎（osteoarthritis，OA）的主要病理是关节软骨细胞的退变，炎症反应增加和细胞外基质的降解。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMPs)的增加促进了细胞外基质蛋白的降解。来源于骨髓间充质干细胞的外泌体具有减轻软骨损伤和炎症的潜力。LncRNAmalat-1可减少关节软骨细胞炎症反应和细胞外基质的降解，起到保护软骨细胞的作用。我们推测过表达lncRNAmalat-1的骨髓间充质干细胞的外泌体对软骨细胞具有重要作用，本研究的目的在于探索过表达lncRNAmalat-1的骨髓间充质干细胞的外泌体对软骨细胞炎症和细胞外基质的影响，进一步阐明过表达lncRNAmalat-1的骨髓间充质干细胞的外泌体在软骨细胞退变中的作用。<br>　　方法：<br>　　（1）通过外泌体分离试剂盒分离骨髓间充质干细胞的外泌体，并通过透射电镜、粒径分析实验和免疫蛋白印记技术鉴定外泌体形态、直径和表面分子标志物。<br>　　（2）使用Ⅱ型胶原酶建立Sprague-Dawley(SD)大鼠骨关节炎模型，通过IL-1β诱导软骨细胞构建OA软骨细胞模型。<br>　　（3）通过慢病毒转染于骨髓间充质干细胞中构建过表达lncRNAmalat-1的稳转株，并提取外泌体进行qRT-PCR检测。<br>　　（4）通过CCK-8检测，Edu染色、ELISA实验、免疫蛋白印迹技术和transwell实验检测软骨细胞活力、增殖、炎症反应、细胞外基质蛋白的降解和细胞迁移能力的变化。通过流式细胞术、Hoechst33342/PI染色和免疫蛋白印迹技术评估软骨细胞凋亡情况。<br>　　（5）使用番红O-固绿(SO)染色和HE染色评估SD大鼠膝关节软骨的形态和病理改变。<br>　　结果：<br>　　（1）外泌体外观呈圆形杯状结构，粒子直径主峰约在144nm，外泌体表面分子标志物CD63、CD81、TSG101表达阳性，说明外泌体分离成功。<br>　　（2）SD大鼠模型骨关节炎模型建立后，观察到软骨表面粗糙，形状不规则，纤维断裂，软骨明显受损，经过外泌体治疗后，软骨损伤情况明显得到改善。软骨细胞经IL-1β诱导后，炎性因子IL-6明显增高，与外泌体共培养后，炎症因子IL-6的表达有所下降。<br>　　（3）两种外泌体经过qRT-PCR检测后，hMSCsmalat-1-Exos中lncRNAmalat-1的表达量是hMSCs-Exos的4.03倍。<br>　　（4）IL-1β组的IL-6、MMP-13和capase-3蛋白表达均明显上升，软骨细胞凋亡也增加，细胞增殖能力、活力和迁移能力均下降。在hMSCs-Exos组中，IL-1β诱导的负性影响得到较大改善，而hMSCsmalat-1-Exos组中，这种改善能力更加明显，IL-6、MMP-13和capase-3蛋白表达均明显下降，细胞凋亡减少，细胞增殖能力、活力和迁移能力均得到提高。<br>　　（5）OA组的大鼠关节软骨层明显受损，OARSI和Mankin评分明显升高，hMSCs-Exos组的关节软骨结构较为清晰，OARSI和Mankin评分有所下降。在hMSCsmalat-1-Exos组中，SD大鼠的关节软骨结构相对hMSCs-Exos组更清晰，表面更光滑，OARSI和Mankin评分进一步下降。<br>　　结论：<br>　　在OA中，过表达lncRNAmalat-1的骨髓间充质干细胞外泌体可促进软骨细胞增殖和迁移，抑制了细胞凋亡、炎症反应和细胞外基质的降解，延缓软骨细胞的退变，具有很好的保护作用。