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摘要背景：<br>　　肺癌是世界上死亡率最高的癌症之一，包括非小细胞肺癌和小细胞肺癌。其中肺腺癌(LUAD)是非小细胞肺癌最常见的亚型。肺腺癌患者主要是通过一系列的治疗（包括手术、放疗、化疗和靶向综合治疗等）进行医治。但由于病情的隐匿性，大多数肺腺癌患者确诊时已处于晚期，无法进行手术治疗，使用其他药物进行治疗后，预后仍然不理想。因此，需要对肺腺癌的发病机制进行更深入的研究，为肺腺癌的治疗提供靶点。miR-182-5p是miR-183/96/182簇中的一员，已有研究发现其在多种细胞和组织中表达，发挥促进或抑制癌症的作用。然而，miR-182-5p调控肺腺癌进展的分子作用机制未见报道。STARD13是一种肿瘤抑制因子，是许多细胞事件的调节器，包括细胞增殖、极性和迁移。YAP/CTGF信号通路的激活在在细胞周期、凋亡、增殖、分化和代谢途径中发挥作用。尽管前人对miR-182-5p和STARD13在不同类型肿瘤中的调节机制进行了研究，但miR-182-5p/STARD13/YAP轴在肺腺癌中可能的调控机制和具体功能仍有待探索，因此本研究将进一步探究该调控轴在肺腺癌恶性进展中的生物学功能及其分子机制。<br>　　目的：<br>　　本研究旨在探讨miR-182-5p在肺腺癌中的表达以及在肺腺癌中的生物学功能。同时寻找miR-182-5p下游靶基因，明确miR-182-5p促进肺腺癌恶性进展的分子作用机制，为肺腺癌靶向治疗提供理论基础。<br>　　方法：<br>　　1、生物信息学分析miR-182-5p在肺腺癌组织中的表达，使用qRT-PCR检测miR-182-5p在肺腺癌细胞（A549、PAa、Calu-3及PC9）和人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达水平。<br>　　2、将miR-182-5pmimic、miR-182-5pinhibitor和对应的阴性对照分别转染到A549和PC-9细胞中，检测miR-182-5p异常表达对肺腺癌细胞的影响：qRT-PCR检测细胞中miR-182-5p的表达。使用CCK-8法检测细胞活力，克隆形成实验检测细胞克隆数，划痕愈合实验检测细胞迁移，Transwell检测细胞侵袭以及细胞成球实验检测细胞成球能力。<br>　　3、生物信息学探索miR-182-5p下游靶基因，使用双荧光素酶报告实验验证miR-182-5p与STARD13的靶向结合关系，Westernblot检测细胞中STARD13的表达水平。<br>　　4、将miR-182-5pinhibitor和si-STARD13共同转染到PC-9细胞系中，检测miR-182-5p/STARD13对肺腺癌细胞的影响：使用CCK-8法、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell实验和细胞成球实验检测细胞的活力、克隆数、迁移、侵袭和细胞成球的能力，免疫荧光检测YAP在细胞中的定位。<br>　　5、将oe-STARD13和YAP-5SA（抑制YAP的磷酸化）共同转染到PC-9细胞系中，检测STARD13是否通过YAP/CTGF轴影响肺腺癌细胞：免疫荧光检测YAP在细胞中的定位，CCK-8法、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell实验、细胞成球实验检测细胞的活力、克隆数、迁移、侵袭和细胞成球的能力。<br>　　结果：<br>　　1、qRT-PCR检测的结果显示，与BEAS-2B相比，miR-182-5p在A549、PAa、Calu-3和PC9中的表达显著上调。<br>　　2、qRT-PCR结果显示，转染miR-182-5pmimic的A549细胞中miR-182-5p的表达显著上调，转染miR-182-5pinhibitor的PC-9细胞中miR-182-5p表达显著下调。细胞功能实验显示上调miR-182-5p的表达后，A549细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞成球能力显著升高；下调miR-182-5p的表达后，PC-9细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞成球能力显著受到抑制。<br>　　3、通过生物信息学发现miR-182-5p下游靶基因STARD13，且与miR-182-5p的表达呈负相关。STARD13在肺腺癌组织和细胞中下调表达。双荧光素酶报告结果显示miR-182-5p与STARD133''UTR有结合位点，靶向关系明确。miR-182-5pmimic可以下调A549细胞中STARD13的表达，miR-182-5pinhibitor上调PC-9细胞中STARD13的表达。<br>　　4、qRT-PCR和Westernblot结果显示，miR-182-5pinhibitor显著上调STARD13mRNA和蛋白的表达，si-STARD13能够下调STARD13mRNA和蛋白的表达。细胞功能实验显示miR-182-5pinhibitor显著抑制PC-9细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞成球能力；而进一步si-STARD13可以逆转miR-182-5pinhibitor对PC-9细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞成球的影响。miR-182-5pinhibitor促进PC-9细胞中YAP移位到细胞质中，si-STARD13共转染后可以抑制YAP移位到细胞质。<br>　　5、免疫荧光检测发现oe-STARD13促进了PC-9细胞中YAP移位到细胞质中，YAP-5SA共转染后可以回复YAP的移位。细胞功能实验结果显示，oe-STARD13可以抑制PC-9细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞成球，而YAP-5SA可以回复oe-STARD13对PC-9细胞增殖、迁移、侵袭和细胞成球的影响。<br>　　结论：<br>　　1、miR-182-5p在肺腺癌组织和细胞中的表达显著上调。<br>　　2、miR-182-5p能够促进肺腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞干性，miR-182-5p在肺腺癌发生发展过程中具有促癌基因的功能。<br>　　3、STARD13在肺腺癌组织和细胞中表达下调，与miR-182-5p的表达呈负相关。在肺腺癌细胞中，miR-182-5p可以靶向下调STARD13的表达。<br>　　4、miR-182-5p可以通过靶向下调STARD13的表达，促进肺腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞干性。<br>　　5、miR-182-5p/STARD13可以通过YAP促进肺腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞干性。<br>　　本研究结果为研究miR-182-5p在肺腺癌中的生物学功能和潜在机制提供新思路，为诊断和治疗肺腺癌提供新的治疗靶点。