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颈交感神经离断在减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及机制

摘要缺血是脑卒中常见原因,而缺血再灌注导致的脑损伤是脑卒中患者临床预后差的主要原因。目前临床主要的治疗方法在急性中风处理中显示出劣势。星状神经节阻滞(Stellate Ganglion Block,SGB)已被广泛应用于多种临床疾病,近年来发挥了良好的疗效。大鼠颈交感神经干离断(Transection of the cervical sympathetic trunk,TCST)被认为是一种令人满意的模拟人类长期SGB的动物模型[1]。我们前期研究发现,TCST可减轻脑缺血再灌注(Cerebral ischemia/reperfusion injury,CI/R)损伤,但是其潜在的是机制是未知的。<br>  目的:<br>  本研究旨在探究颈交感神经离断对脑缺血再灌注损伤的影响及机制。<br>  方法:<br>  1.30只雄性SD大鼠随机分为三组:假手术组(Sham组),脑缺血再灌注组(I/R组),I/R组+TCST组(TCST组),每组10只。Sham组仅暴露血管,其余两组在大脑中动脉阻断90分钟后再灌注24小时,制作脑缺血再灌注模型,TCST组在再灌注后给予左侧交感神经离断。<br>  2.24小时应用改良的神经系统严重程度评分评估神经功能。<br>  3.神经功能评估后应用10%水合氯醛给予腹腔麻醉,迅速剪断其头部取出完整脑组织,2%TTC溶液测定脑组织梗死体积比。<br>  4.各组大鼠分别于再灌注后24h水合氯醛麻醉后,腹主动脉采血2ml,离心取上清后应用Elisa法检测TNF-α水平。<br>  5.各组大鼠再灌注24h后完整剥离脑组织,提取脑组织蛋白,应用Western blot实验检测TLR4、Caspase3、cleaved-caspase3、IL-6、IL-1β蛋白的表达,以GAPDH作为内参对照。<br>  结果:<br>  1.Sham组大鼠神经功能正常,脑组织无梗死;与Sham组比较,I/R组神经功能评分增高,脑梗死体积增大(P<0.05);TCST组神经功能评分、脑梗死体积较I/R组降低(P<0.05)。<br>  2.Elisa分析发现血清炎症因子表达:与Sham组比较I/R组TNF-α表达升高(P<0.05);与I/R组比较,TCST组TNF-α表达降低(P<0.05)。<br>  3.Western blot实验分析蛋白表达情况:与Sham组比较I/R组TLR4、Caspase3、cleaved-caspase3、IL-6、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05);与I/R组比较,TCST组TLR4、Caspase3、cleaved-caspase3、IL-6、IL-1β蛋白表达降低(P<0.05)。<br>  结论:<br>  颈交感神经离断可减轻脑缺血再灌注损伤炎症反应和脑损伤,颈交感神经离断的保护作用可能与降低TLR4有关。

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