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摘要研究背景<br>　　肝癌作为预后较差的消化道恶性肿瘤之一，近年来其发病率和死亡率在全球范围内常年处于高位，我国更是肝癌大国，占世界肝癌死亡病例的一半以上。肝癌发病隐匿，大部分患者就诊时已为晚期，晚期肝癌患者预后不佳，其五年生存率仅有10％左右。因此，探索肝癌的发生发展机制及寻求有效的治疗靶点具有重要的临床意义。较多的研究已证实Wnt/β-catenin信号通路在肝癌的发展过程中起到非常重要的作用，近些年Wnt/平面细胞极性（PlanarCellPolarity,PCP）信号通路与肿瘤的发生关系也备受关注。VANGL1作为PCP通路中的核心蛋白被发现在多种肿瘤中异常表达且影响肿瘤的生物学行为，然而，VANGL1在肝癌中的表达及功能未见详尽报道。本研究考察了VANGL1在肝癌细胞及组织中的表达情况，并明确了VANGL1在肝癌中的生物学功能及可能机制，为肝癌的发生机制及治疗靶点的挖掘提供思路和依据。<br>　　研究方法<br>　　1.挖掘癌症基因组图谱（TCGA）数据库中肝癌组织和正常人肝组织组中VANGL1转录水平。应用qRT-PCR方法在10对新鲜肝癌组织及相对应的癌旁组织中验证VANGL1的mRNA表达水平。通过qRT-PCR方法考察VANGL1在肝癌细胞和正常人肝细胞中的表达水平。使用免疫组织化学染色方法考察VANGL1在肝癌组织中的蛋白表达水平。分析VANGL1的表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。<br>　　2.选择VANGL1相对低表达的肝癌细胞（Huh-7），通过过表达质粒转染过表达VANGL1，选择VANGL1相对高表达的肝癌细胞（SNU-449），通过小干扰质粒敲减VANGL1，qRT-PCR和WesternBlot验证转染效率。通过CCK8、创伤愈合，Transwell和流式细胞仪等方法分别考察VANGL1过表达和敲低后对肝癌细胞的生物学功能的影响。<br>　　3.在VANGL1稳定过表达和敲减的肝癌细胞中，通过qRT-PCR和WesternBlot检测上皮间质样转化（EMT）相关分子的mRNA和蛋白表达，分析VANGL1影响肝癌生物学行为可能的分子机制。<br>　　研究结果<br>　　1、TCGA数据库分析结果表明，与正常人肝组织相比，VANGL1在肝癌组织中表达升高（P＜0.05），且高表达VANGL1的患者表现为中位总生存时间（OS）的缩短。在10对肝癌组织中，VANGL1的mRNA的表达也显著高于癌旁组织（P＜0.05）。相对于正常肝细胞LO2，VANGL1的表达在肝癌细胞（Huh-7、SNU-449、7721、HLE、Hep-3B、7404）中高表达（P＜0.05）。<br>　　2、在肝癌细胞（Huh-7）中过表达VANGL1不影响肝癌细胞的增殖和凋亡，但可促进肝癌细胞的侵袭和迁移能力。在肝癌细胞（SNU-449）中敲减VANGL1同样不影响肝癌细胞的增殖和凋亡，但能够抑制肝癌细胞的侵袭和迁移能力。<br>　　3、在肝癌细胞（Huh-7）中过表达VANGL1后，EMT相关分子N-cadherin表达下调，E-cadherin、Slug和Vimentin表达上调；在肝癌细胞（SNU-449）中敲减VANGL1后，EMT相关分子N-cadherin表达上调，E-cadherin、Slug和Vimentin表达下调。<br>　　研究结论<br>　　1、VANGL1在肝癌组织和肝癌细胞中高表达，且和肝癌患者预后不良相关。<br>　　2、肝癌细胞中上调或下调VANGL1，不影响肝癌细胞增殖和凋亡，但可影响肝癌细胞的侵袭和迁移能力。<br>　　3、VANGL1影响肝癌侵袭和迁移可能和EMT有关。