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摘要【目的】<br>　　1.观察乙肝病毒蛋白X（HBX）对肝细胞癌细胞株的作用。<br>　　2.比较缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）对乙肝后肝细胞癌治疗的应用价值。<br>　　3.探讨乙肝病毒蛋白X（HBX）和缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）在乙肝后肝细胞癌发病机制中的作用。<br>　　【方法】<br>　　选取人肝癌细胞株Huh-7，合成过表达HBX的慢病毒载体并转染Huh-7细胞株，用嘌呤霉素筛选出稳定转染HBX的细胞株，标记为Huh-7-HBx，比较两者在细胞迁移、增殖方面的差异，并用Westernblot检测两者HIF-2α的表达情况。合成敲减HIF-2α的Si-RNA，并转染Huh-7-HBx，构建瞬时转染的HIF-2α低表达细胞株，并进一步检测在HIF-2α敲减后，Huh-7-HBx在HIF-2α低表达的情况下，其迁移能力、增殖活性以及肿瘤干性与未敲减前相比，两者之间的差异。<br>　　【结果】<br>　　1.HBX、HIF-2α表达相关性：在转染慢病毒组中，HIF-2α高表达与HBX表达有关。<br>　　2.HBX表达对细胞增殖活力的影响：用CCK-8检测两组细胞OD值，发现HBX（+）细胞组与HBX(-)细胞组相比，其在24h、48h、72h时HBX（+）细胞组OD值均高于HBX(-)细胞组（P＜0.01）。<br>　　3.HBX对肿瘤细胞迁移能力的影响：在HBX（+）细胞组中，其24h细胞迁移能力较HBX（-）细胞组更强（P＜0.01）。<br>　　4.HIF-2α对HBX(+)细胞迁移、增殖活性的影响：在HBX（+）细胞组中，抑制其HIF-2α表达，发现HIF-2α表达降低后细胞迁移能力以及增值活力明显下降（P＜0.01）。<br>　　5.HIF-2α对HBX(+)肿瘤干性的影响：在HBX（+）细胞组中，敲低其HIF-2α表达，肿瘤干性标志CD24/CD44明显下降。<br>　　【结论】<br>　　1.HBX显著提升肝细胞癌的增殖能力及迁移能力；<br>　　2.HIF-2α在肝细胞癌的发生发展中主要起促癌作用；<br>　　3.HBX可以通过提升HIF-2α表达，进而发挥相应促癌效应。