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摘要研究背景<br>　　帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）是第二大常见的神经退行性疾病，影响2%的65岁以上的人口，全世界有700万至1000万人受到其影响。PD的主要病理表现为黑质致密部（SubstantiaNigraparscompacta，SNpc）多巴胺能（Dopaminergic，DA）神经元的早期选择性丢失和α-突触核蛋白（α-synuclein）的异常聚集。<br>　　目前已知黄酮类化合物在抗炎、抗肿瘤以及治疗神经退行性疾病方面具有重要作用。其中文献报道来源于天然植物明日叶的黄酮类化合物4,4''-二甲氧基查耳酮（4,4′-dimethoxychalcon，DMC）可以通过促进自噬延缓酵母、小鼠等个体的寿命，但在PD中是否具有神经保护作用以及其保护作用机制目前尚不清楚。<br>　　目的<br>　　研究黄酮类化合物DMC在PD中的神经保护作用，并探讨其药理学机制。<br>　　方法<br>　　通过1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-Methyl-4-Phenyl-1,2,3,6-Tetrahydropyridine，MPTP）制备PD小鼠模型，并同时进行腹腔注射给予50mg/kg和100mg/kg剂量DMC，通过旷场、抓力、爬杆、转轴行为学测试及免疫组化和蛋白质印迹（WesternBlotting，WB）证实DMC是否改善PD小鼠运动障碍及减缓DA神经元死亡。使用代谢组学、计算机分子对接、小分子药物和蛋白亲和力实验寻找并检测DMC作用的靶点，并通过RNA测序检测相关信号通路。进一步，在体内外水平构建PD细胞模型，给予FMN处理，检测DMC下游底物FMN发挥抗氧化应激的作用及信号通路，并验证其对PD动物模型的保护作用。接着，通过慢病毒敲低RFK并给予DMC处理后，通过实时荧光定量QPCR（QuantitativeReal-time，QPCR）、免疫组织化学法、蛋白质免疫印迹法验证RFK是否是DMC发挥抗氧化应激作用的关键靶点。此外，构建腺相关病毒人源α突触核蛋白（Adeno-AssociatedVirus-humanα-synuclein，AAV-hα-Syn）PD小鼠模型，经DMC处理后，检测DMC通过抗氧化应激对α-Syn模型小鼠的作用。<br>　　结果<br>　　给予50mg/kg和100mg/kg剂量DMC可以改善慢性MPTP诱导的PD模型中的运动障碍和DA神经元死亡。代谢组学结果表明，DMC可以上调MPTP模型黑质FMN的含量，结合RNA-seq结果，初步推测DMC可以通过磷酸化PKCθ调节PD模型中的核黄素代谢，具体表现为通过促进RFK表达增加FMN的水平进而发挥神经保护作用。<br>　　体内外实验给予FMN处理后结果表明，FMN可以改善MPP+造成的氧化应激损伤及DA神经元变性，FMN可以改善MPTP模型小鼠的运动行为障碍和DA神经元死亡。RFK敲低后抑制了DMC在PD模型的保护作用，证实RFK是DMC介导FMN产生并发挥保护作用的关键靶点。此外，DMC也改善了AAV-hα-SynPD模型中的氧化应激损伤。<br>　　结论<br>　　DMC通过调节RFK/FMN通路改善PD中氧化还原失衡，进而改善运动行为障碍和多巴胺神经元损伤。