检索历史 清除

摘要背景脑静脉窦血栓形成（CVST），作为一种特殊类型的脑卒中，虽然少见，却对患者造成潜在的致命威胁。干预CVST后脑水肿是改善患者预后的重要手段。动脉性卒中后AQP4(水通道蛋白4)表达增加，并与脑水肿密切相关，同时NF-κB（核因子-κB）促进多种炎症因子的释放，并促进AQP4的表达，加重脑水肿。Shp-1（含SH2域的蛋白质酪氨酸磷酸酶1）是一种炎症反应的负调节因子，在动脉性脑卒中后通过调控NF-κB的磷酸化参与炎症反应。目前，AQP4在动脉性卒中引发脑水肿的作用及其机制研究的已经很多，但对于AQP4在脑静脉窦血栓形成后引发脑水肿中是否发挥作用及其可能的机制仍不清楚。<br>　　目的本研究旨在探讨AQP4在CVST后引发的脑水肿中是否发挥作用，并探究其可能的作用机制，为脑静脉窦血栓形成的治疗和改善患者的预后提供新的思路与理论依据。<br>　　方法本研究选用体重约250g-280g的成年雄性Sprague–Dawley大鼠，用40%三氯化铁制作CVST模型。将大鼠根据不同实验目的将不同批次的实验大鼠分组，涉及到的分组有Control组、Sham组、CVST组、CVT+vehicle组、CVST+TGN-020组、CVST+TPI-1组、CVST+JSH-23组。采用TTC染色及解剖模型制作后的上矢状窦的方法以验证模型的制作成功与否。使用干湿比重法测定各实验处理后大鼠脑含水量的变化，以观察脑水肿的情况。为了观察脑组织内AQP4、NF-κB、Shp-1是否参与了CVST引发的脑水肿及它们之间的相互关系，我们给予了不同实验组的大鼠分别腹腔注射TGN-020（一种AQP4的选择性抑制剂），TPI-1（一种Shp-1的特异性抑制剂）以及JSH-23（一种NF-κB的选择性抑制剂），并使用Westernblot技术检测各不同实验处理后大鼠脑组织AQP4、NF-κB、Shp-1的蛋白表达。为进一步验证CVST后AQP4与NF-κB、Shp-1以及脑水肿的关系，我们使用了免疫荧光染色技术观察各实验组AQP4的表达变化。<br>　　结果本研究发现CVST后，脑内AQP4、Shp-1的表达以及NF-κB的磷酸化均增加。抑制AQP4会使CVST后24小时时的脑含水量减少，而给予CVST大鼠腹腔注射TP-1后，NF-κB的磷酸化增强，AQP4的表达水平增加，并且脑含水量也随之增加。抑制CVST大鼠脑组织NF-κB的活化后，AQP4的表达下降，脑含水量下降，而Shp-1的表达未见明显变化。<br>　　结论CVST导致的脑水肿与AQP4的表达密切相关，而且首次揭示了Shp-1、NF-κB与AQP4共同参与了CVST后脑水肿的病理进程，并提出了其潜在的调控路径，即Shp-1通过调控NF-κB的磷酸化调节AQP4的表达，进而影响脑水肿。我们的结论为CVST的治疗及改善患者预后提供了新的潜在靶点与理论依据。