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摘要C型凝集素是昆虫先天免疫防御系统中识别病原微生物的模式识别受体之一，具有参与细菌的识别与清除、调节血液封装和黑化等多方面的功能。随着柞蚕产业发展的同时，目前，出现一系列病原微生物入侵引起的健康问题，严重影响了柞蚕的产量，挖掘柞蚕体内响应病原微生物胁迫的关键因子，可为柞蚕的免疫防御机制研究提供可靠的数据支撑。<br>　　本研究首先从柞蚕转录组数据库中筛选得到一种免疫相关因子——C型凝集素，将其命名为ApCTL4-X1（GenBank登录号：MZ851153），通过对其cDNA序列分析，发现柞蚕ApCTL4-X1的cDNA序列由669个碱基构成，编码228个氨基酸，在线网站对蛋白质性质预测，发现凝集素ApCTL4-X1是一个含有信号肽、具有亲水性、无跨膜区的分泌型蛋白。<br>　　实时定量PCR检测到ApCTL4-X1基因在野生型柞蚕蛹体壁的表达量远远高于血淋巴、脂肪体和生殖器。经不同病原微生物刺激柞蚕蛹后，发现在柞蚕的脂肪体中，大肠杆菌的刺激导致ApCTL4-X1基因的大量表达，其上调幅度远高于其他病原微生物对柞蚕其他组织的刺激，说明凝集素ApCTL4-X1在脂肪体中对大肠杆菌的入侵做出快速的反应和精确性的免疫。<br>　　通过构建pET28a-ApCTL4-X1质粒，对凝集素ApCTL4-X1进行原核表达和纯化。凝集试验结果显示，凝集素ApCTL4-X1是钙离子依赖型蛋白，能使溶壁微球菌、金黄色葡萄球菌、解磷菌、白色念珠菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肠沙门氏菌、固氮菌和血细胞发生凝集，并且对解磷菌和肠沙门氏菌的凝集效果最好。抑菌实验结果显示，凝集素ApCTL4-X1对金黄色葡萄球菌、肠沙门氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、甲基营养型芽孢杆菌均有抑制效果，并且对大肠杆菌的抑菌效果最明显。运用ELISA酶联免疫吸附和糖竞争性抑制凝集的方法检测到凝集素ApCTL4-X1可以与肽聚糖、菊糖、脂多糖、D-半乳糖结合，其中与D-半乳糖结合能力最强。将凝集素ApCTL4-X1添加到柞蚕血淋巴中可能会使苯酚前体氧化酶的激活，导致血淋巴黑化的速度加快，当ApCTL4-X1凝集素与PGN、D-半乳糖结合时，血淋巴黑化的速度也增加。<br>　　综上，柞蚕凝集素ApCTL4-X1作为模式识别受体，在柞蚕的免疫防御中发挥着不可或缺的作用，研究结果为深入了解柞蚕固有免疫防御机制提供了一定的理论支持，对保护柞蚕和开发新的害虫控制策略提供新想法。