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摘要口腔黏膜给药是经口腔黏膜将药物递送至黏膜局部或体内，从而起到药物局部治疗或全身循环的作用。目前，临床上口腔黏膜给药常用于口腔黏膜病的局部治疗。口腔黏膜病包括口腔溃疡病、口腔黏膜炎症、口腔潜在恶性疾病等，这些疾病会给患者带来疼痛、不适和焦虑，影响患者的生活质量。其中，口腔扁平苔藓（orallichenplanus，OLP）是一种常见的慢性口腔黏膜炎症，在黏膜病灶处局部给药是一种重要的治疗方法。由于“唾液流动”效应的影响，经黏膜给药效率较低，而局部注射给药会引起明显的疼痛。因此，开发一种可以在口腔黏膜局部高效、无痛、安全给药的新型给药系统具有重要意义。微针（microneedles，MNs）是一种新型药物递送系统，能够克服唾液流动、打破生理屏障，将药物直接递送至黏膜组织内部。微针治疗具有无痛微创、可自主操作、患者友好等优势，可用于经口腔黏膜的药物或疫苗递送，具有良好的临床应用前景。因此，本论文提出利用分步浇注法制备用于口腔黏膜给药的具有不同结构的可溶性微针，装载一种或两种治疗药物，实现在口腔黏膜局部快速释放或梯级次序释放药物的目的。研究工作主要包含以下内容：<br>　　在第二章中，采用两步浇注法制备了用于口腔黏膜快速给药的可溶性微针，将药物聚集于针尖上部，实现局部快速释放。微针贴片由两部分组成，包括载药微针阵列和背衬层。选用倍他米松磷酸钠（betamethasonesodiumphosphate，BSP）为模型药物。微针由透明质酸（hyaluronicacid，HA）和聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrrolidone，PVP）组成，利用HA和PVP溶解性的差异，将BSP聚集于微针HA针尖部分，PVP基底部分起到支撑和提高机械强度的作用，该结构克服了微针载药部分因黏膜弹性导致无法完全刺入组织的问题，避免药物浪费。使用刮涂法制备背衬层，将其与微针连接得到微针贴片，用于增强微针贴片抵抗唾液流动的能力，进一步提高给药效率。首先，通过机械强度和溶解速度进行评价，研究并优化了制备HA-PVP微针的聚合物配方。之后，对HA-PVP微针的形貌、机械强度、载药量、药物释放和安全性等特征进行系统研究。实验结果表明，HA-PVP微针结构规则，药物仅分布在HA针尖部分（约占微针高度的63%）而基底部分几乎没有药物分布。HA-PVP微针具备在较高湿度下保持一定机械强度的能力。体外黏膜穿刺表明，HA-PVP微针可以穿透口腔黏膜，刺入深度约为100μm。HA-PVP微针的载药量可以通过调整HA溶液中的药物含量来控制，制备了符合OLP临床治疗剂量的微针（约含0.48mgBSP）。HA-PVP微针在接触黏膜时针尖便开始快速溶解，根据体外溶解实验结果，该微针使用时的按压时间建议大于20s。体外药物释放和大鼠体内药物渗透实验结果显示，使用HA-PVP微针1h后，体外的药物释放总量超过90%，体内黏膜药物扩散结果显示，大量药物已经扩散至大鼠口腔颊黏膜基底细胞，实现了药物的快速释放以及促进药物在黏膜下渗透的目的。此外，该微针治疗是微创且安全的，动物实验中大鼠黏膜未出现明显红肿或水肿，6h后黏膜几乎完全恢复，组织学分析也未见明显炎症反应。细胞毒性和体内急性毒性显示，所选用微针材料对HOK细胞的活性和大鼠的主要脏器无明显毒性，进一步表明HA-PVP微针具有良好的生物安全性。因此，HA-PVP微针可以在口腔黏膜实现高效、无痛、快速、安全的药物递送，为OLP的局部治疗提供了新手段。<br>　　在第三章中，采用三步浇注法制备了用于口腔黏膜梯级给药的可溶性微针，将两种药物分别装载在微针中具有不同释放性能的部分，实现局部梯级次序释放，达到联合治疗的目的。微针贴片由两部分组成，包括载药微针阵列和背衬层。在第二章研究的基础上，结合甲基丙烯酰化透明质酸（hyaluronicacidmethacrylate，HAMA）水凝胶可缓慢释放药物的特点，制备了HAMA-HA-PVP微针。该微针由HAMA、HA和PVP三种聚合物材料组成，选用染色剂作为药物模型。缓释药物模型装载于交联HAMA部分，随着HAMA在组织液中的溶胀而缓慢释放；速释药物模型装载于HA部分，随着HA的溶解而快速释放；PVP部分用于提供微针的主要机械强度。同样地，具有防水功能的背衬层用于抵抗唾液流动的影响。通过研究光交联时间对HAMA微针溶胀特性的影响和观察不同浓度HA溶液制备微针的形貌优化微针配方。之后，对HAMA-HA-PVP微针的形貌、机械强度、载药量、药物释放和安全性等特征进行系统研究。实验结果显示，HAMA-HA-PVP微针形貌规则，速释药物模型和缓释药物模型分别装载在微针的不同部分。其中，装载在HAMA或HA部分的亲水性药物模型可以聚集在针尖，而亲脂性药物模型会向PVP基底部分扩散，引起药物浪费，说明该微针体系更适合于装载亲水性药物。HAMA-HA-PVP微针具有足够的机械强度，并且药物的装载几乎不会对其机械强度造成影响。在体外刺入实验中，微针的穿透深度约为190μm，足以穿过黏膜上皮并将药物直接递送到黏膜基底细胞。HAMA-HA-PVP微针的载药量较为稳定，相对标准偏差小于10%；该微针使用时的按压时间建议大于30s。体外药物释放曲线展示了微针的梯级次序释放特性，模型药物亚甲基蓝被快速释放，在2h内的释放量超过85%，而模型药物磺酰罗丹明B被缓慢释放，2h内仅释放载药总量的40%。使用微针材料培养HOK细胞，经过24h、48h和72h的培养后，细胞活性均大于98%，证明HAMA-HA-PVP微针具备良好的生物相容性。所以，该微针可以在口腔黏膜局部以不同速度次序递送两种亲水性药物，在OLP或其他口腔黏膜病的药物联合治疗方向具有应用前景。<br>　　综上所述，本文通过分步浇注法成功制备了可装载一种或两种治疗药物的具有不同结构的可溶性微针，实现在口腔黏膜的高效、无痛、安全的局部药物递送和控制释放。研究结果为OLP或其他口腔黏膜病的药物单一治疗和药物联合治疗提供了新的方法，具有临床应用潜力。