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LARP7基因参与调控细胞增殖

摘要LARP7是LA蛋白家族成员之一,之前研究表明LARP7是一种RNA结合蛋白,能够稳定细胞核内长链非编码RNA7SK(lncRNA7SK)的构象防止其被体内核酸内切酶水解。在磷酸盐甲基化加帽酶(MePCE)作用下形成稳定7SKSNP,7SKSNP与转录延伸因子(P-TEFb)结合形成大的复合体抑制P-TEFb活性,从而抑制RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)从转录活性“暂停”状态释放,进而抑制转录延伸。我们研究发现,LARP7敲除后细胞增殖减慢,为了验证是否因为激活P-TEFb而影响了细胞增殖,我们在LARP7敲除的细胞中敲低CDK9,发现敲低CDK9并不能回复细胞的增殖。为了探索其分子机理,我们利用RNAseq技术分析发现LARP7敲除后P53信号通路明显上调。所以我们猜想LARP7可能通过P53信号通路参与细胞增殖的调控。我们在LARP7敲除的情况下敲低P53,发现细胞增殖回复,说明LARP7通过P53信号通路参与细胞增殖的调控。<br>  由于LARP7通过P53信号通路参与细胞增殖的调控,那么LARP7基因是否在肿瘤的发生发展中发挥功能,分析TCGA数据库中数据发现,多个肿瘤样本中存在LARP7突变。为了验证这些突变是否影响LARP7蛋白的功能,我们克隆了22个LARP7蛋白的突变体,发现所有点突变都未影响LARP7蛋白对7SK的稳定作用,而移码突变体均不能稳定7SK,说明LARP7蛋白C末端对7SK的稳定至关重要。另外我们分析了蛋白的半衰期,发现C末端缺失的突变体蛋白半衰期明显变短,说明LARP7蛋白C末端结构的完整有利于稳定LARP7蛋白。<br>  综上所述:LARP7基因通过P53信号通路参与细胞增殖的调控。LARP7蛋白C末端结构的完整有利于7SKRNA的稳定,同时有利于其自身蛋白稳定。

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导师 李沁桐
分类号 Q78
发布时间 2023-02-08
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