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摘要癫痫猝死(suddenunexpecteddeathofepilepsy,SUDEP)是癫痫患者的重要死亡原因之一。围发作期的呼吸抑制合并意识障碍是其发生的重要病理生理基础。其可能机制是围癫痫发作期的抑制性电活动从皮层向脑干扩散，包括中缝核在内的神经核团电活动受抑制，即中枢神经扩散性去极化（spreadingdepolariztion，SD），引起相应的觉醒、呼吸等功能的障碍，促使SUDEP的发生。而既往研究表明，电刺激丘脑中央外侧核（centrallateralnucleusofintralaminarthalamus，CL）可显著改善癫痫发作后意识障碍，解除发作后的脑电抑制，恢复至正常生理水平。此外，中缝核5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）能神经元参与觉醒和呼吸调控等生理活动，而其功能的异常是SUDEP发生的重要机制。故推测电刺激CL可通过解除癫痫发作对神经元的抑制作用，恢复中缝核5-HT能等神经元功能活动，改善围发作期的意识水平，进而终止SUDEP的发生，可能是SUDEP干预的潜在靶点。<br>　　目的：<br>　　初步探讨电刺激丘脑中央外侧核对DBA/1小鼠SUDEP模型的挽救作用，并对其可能机制进行研究。<br>　　方法：<br>　　将出生后21天雄性DBA/1小鼠分为刺激组，假手术组、模型组和空白组。对除空白组之外的三组小鼠，连续7天予以一定强度的声音刺激，诱发其癫痫发作。当出现癫痫诱发呼吸暂停时（seizure-inducedrespiratoryarrest，S-IRA），及时予以呼吸复苏，筛选出对S-IRA易感的小鼠作为SUDEP动物模型。制作双极刺激电极，并根据图谱植入刺激组和假手术组小鼠CL处及左侧前额叶皮质，分别用于刺激和记录皮层电信号。待术后7天后再次用相同强度声音刺激诱发刺激组，假手术组和模型组小鼠，当出现S-IRA时对刺激组对CL予以一定强度电刺激，而其余两组不做其他处理，连续刺激5天。记录并计算三组小鼠S-IRA后复苏率、S-IRA发生率、声音诱发癫痫发作的程度评分以及左侧前额叶皮质的局部场电位（localfieldpotential，LFP）。对刺激组小鼠进行90分钟的连续电刺激后，将四组小鼠处死并取其脑干部分。分别应用免疫荧光法、westernblot法和q-PCR技术对比刺激组、假手术组、模型组和空白组脑干中缝核色氨酸羟化酶2（tryptophanhydroxylase-2，TPH2）和c-fos的表达差异。<br>　　结果：<br>　　1.行为学结果?示，刺激组S-IRA后复苏率显著高于假手术组（P=0.011）和模型组（P=0.009）；但刺激组、假手术组和模型组S-IRA发生率（P=0.4973）和声音诱发癫痫发作程度（P=0.7560）均无明显差异。<br>　　2.局部场电位结果?示，小鼠出现声音诱发癫痫发作时，前额叶皮质神经元放电频率增大，波幅增高，并夹杂大量运动伪迹；出现S-IRA时，同步LFP可见频率和波幅减低；电刺激CL后，神经元放电频率和波幅逐渐增强，同时伴有呼吸活动和肢体运动的恢复。<br>　　3.Westernblot检测结果显示，空白组TPH2表达较刺激组（P=0.010）、假手术组（P=0.002）和空白组（P=0.001）均显著增高，而刺激组TPH2表达较假手术组和模型组稍高，但无统计学意义（P=0.258，P=0.126）；刺激组c-fos的表达量稍高于假手术组、模型组和空白组，但差异无统计学意义（P=0.068）。<br>　　4.qPCR检测结果显示，刺激组TPH2mRNA表达较模型组（P=0.004）显著增加，而较假手术组（P=0.119）和空白组（P=0.263）均无明显差异，空白组TPH2mRNA表达较模型组（P=0.023）显著增加，而与假手术组的表达差异无统计学意义（P=0.602）；刺激组c-fosmRNA表达较模型组（P=0.010）和空白组（P=0.021）显著增加，而与假手术组（P=0.065）的差异无统计学意义。<br>　　5.免疫荧光结果显示，在脑干神经元细胞胞质内可见c-fos和TPH2的表达。统计在5-HT阳性细胞中c-fos阳性的占比：刺激组、假手术组、模型组和空白组分别为：70.82%±18.18%，17.79%±6.40%，14.26%±10.52%，18.35%±8.61%。各组之间无统计学差异（P=0.056）。<br>　　结论：<br>　　1.刺激丘脑中央外侧核（CL）对DBA/1小鼠SUDEP具有挽救作用。<br>　　2.电刺激CL对SUDEP的挽救作用机制可能是，解除了中枢神经去极化对神经元电活动的抑制作用，使包括中缝核5-HT能神经元在内的神经核团活动增强，促进呼吸运动和觉醒反应的产生，从而终止SUDEP的发生。