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摘要背景与目的：<br>　　TCEB1（transcriptionelongationfactorB）基因突变型肾细胞癌是新发现的肾脏肿瘤，在2016版世界卫生组织（WHO）肾脏肿瘤分类中尚未纳入。该类肾细胞癌虽然与经典的透明细胞肾细胞癌在形态学上有重叠，但仍具有较独特的形态学特点、免疫表型和分子遗传学改变，可能是独立的肾细胞癌亚型。本研究的目的是（1）分析TCEB1基因突变型肾细胞癌的临床病理特点；（2）分析TCEB1基因突变型肾细胞癌的基因改变/分子遗传学特征，探讨其分子基础。<br>　　材料和方法：<br>　　（1）复习四川大学华西医院2014年1月至2020年12月确诊的肾细胞癌共3406例，筛选出免疫组化CAIX（+）、CK7（+）的病例263例。由两位泌尿病理亚专业医师评估形态学特点，筛选有胞质透明的肿瘤细胞构成的上皮成分并有纤维/平滑肌间质成分的病例共147例，进行TCEB1基因突变检测分析，确诊TCEB1基因突变型肾细胞癌30例。另纳入来自院外会诊并经基因突变检测确诊为TCEB1基因突变型肾细胞癌病例1例，以及经NGS检测发现的TCEB1基因突变型肾细胞癌2例。<br>　　本研究共获得经分子检测确诊的TCEB1基因突变型肾细胞癌33例。对33例TCEB1基因突变型肾细胞癌进行FISH检测验证是否存在染色体3p缺失；总结这些病例的临床表现，评估组织形态学特点，进行CAIX、AMACR、CK7、CD10、PAX8、SDHB、FH、TFE3等免疫组织化学染色检查。获取并分析本组病例的随访结果。<br>　　（2）选送22例经Sanger测序证实的TCEB1基因突变型肾细胞癌和6例Sanger测序阴性病例6例。镜下评估肿瘤占比，选择最佳的石蜡组织提取DNA进行二代测序。使用实体肿瘤539基因Panel进行测序，生物信息学技术分析突变类型、拷贝数变异等，计算肿瘤突变负荷（TMB）。运用DAVID在线工具对突变基因进行通路富集分析，探讨TCEB1基因突变型肾细胞癌发生发展的可能分子通路。<br>　　结果：<br>　　本研究共获得经分子检测确诊的TCEB1基因突变型肾细胞癌33例，临床病理资料及分子遗传学结果总结如下：<br>　　（1）临床特点：患者年龄25.0~69.0岁（平均50.3），40~60岁居多。男性患者明显多于女性（M∶F=32∶1），33例病患中仅有一名女性患者。患者多无明显临床症状，常偶然发现肾脏占位（71.8%），少数患者（28.2%）出现腰腹部疼痛、尿频尿急等症状。肿瘤常累及单侧肾脏，未发现患者有任何遗传性综合征表现。TNM分期均为Ⅰ期，其中T1a期患者31例（94.0%），T1b期患者2例（6.0%）。33例患者均接受手术治疗，包括根治性肾切除术7例（21.2%），保留肾单位手术26例（78.8%）。<br>　　（2）病理特征：肿瘤最大径1.0~5.0cm，平均直径2.5cm。切面呈实性（18例，54.5%）或伴囊性变（15例，45.5%）。镜下可见所有肿瘤周围有厚纤维被膜包裹，与周围正常肾脏组织分界清楚。肿瘤细胞形成的组织结构多样，可形成腺泡状、分支管状、乳头状、实性片状等结构。29例（87.9%）病例中可见到大小不等的富含甲状腺胶质样物的腺腔样结构，腺腔中可见到胞质透明的细胞构成的小乳头，构成乳头结构的细胞可见分泌现象。肿瘤细胞大多胞膜清楚，胞质透明或嗜酸性，含丰富的胞质，个别病例胞质稀少。肿瘤细胞胞核圆形或卵圆形，多位于基底部，5例（15.1%）肿瘤的局灶区域可见肿瘤细胞胞核远离基底部，形成类似于透明细胞乳头状肾细胞癌的经典组织结构。肿瘤细胞核级较低，按WHO/ISUP核分级标准：4例为1级，29例为2级。所有肿瘤均未见坏死和淋巴管、血管侵犯，核分裂少见。所有肿瘤均可见数量不等纤维/平滑肌间质成分，分割肿瘤。富于淋巴细胞和间质水肿等区域亦可在部分肿瘤中见到。<br>　　（3）免疫表型：肿瘤细胞CAIX弥漫强阳性，胞膜呈“盒状”阳性模式（完整膜阳性）。所有病例均不同程度表达CK7，11例（33.3%）呈弥漫强阳性，13例（39.4%）部分肿瘤细胞中等强度阳性，9例（27.3%）表现为局灶弱阳性。CD10在多数病例中阳性，表达强度不等，15例（48.3%）肿瘤细胞呈弥漫强阳性，14例（45.2%）肿瘤细胞呈中等强度阳性或弱阳性，仅2例（6.5%）阴性。19例（79.2%）肿瘤细胞部分弱阳性表达AMACR；6例（20.8%）AMACR阴性。所有肿瘤细胞PAX8均为阳性。SDHB、FH均未见缺失。TFE3阴性。<br>　　（4）分子遗传学特点：33例TCEB1基因突变型肾细胞癌突变密码子多样，其中79密码子为突变热点，共30例（28例Y79C，2例Y79S），另检测出95密码子突变（I95N）、92密码子（E92K）和112密码子（C112fs）各1例。所有病例均未见染色体3p缺失。NGS检测结果显示24例肿瘤共251个体细胞突变，涉及128个基因，错义突变最常见（169个），其余突变方式有同义突变、移码突变等。<br>　　除TCEB1基因之外，TSC基因为其中突变率最高的基因，发生于13例（54.2%）病例中，其中6例为TSC1基因突变，6例为TSC2基因突变，1例为TSC1与TSC2基因共同突变。6例TSC1基因突变病例中2例为同义突变，余4例均为剪切变异伴错义突变：3例为322密码子突变（M322T）；另1例有2个密码子突变：84密码子突变（A84T）和322密码子突变（M322T）。6例TSC2基因突变病例中3例为同义突变，余3例均为错义突变：1例为196密码子突变（A196T）；1例为286密码子突变（M286V）；1例为1036密码子突变（S1036T）。同时伴TSC1和TSC2基因的病例表现为：TSC1基因剪切变异伴322密码子（M322T）错义突变；TSC2基因1744密码子错义突变（L1744F）。<br>　　拷贝数分析发现4例（16.7%）出现基因拷贝数增加，其中2例（8.3%）出现FGF3基因增加，1例出现ERCC1基因增加，1例为FGF3基因和FGF4基因增加。TMB分析发现23例TMB值有效，TMB范围为0.849~7.752mut/Mb，中位值为3.917mut/Mb，平均值3.763mut/Mb，有8例（34.8%）患者显示TMB大于5。TMB值的高低与年龄（P=0.324）、有无TSC基因突变（P=0.166）、79号密码子突变类型（P=0.268）均无明显相关性。。<br>　　（5）预后分析：本组病例随访时间4.0~82.0月，中位随访时间19.0月，平均随访时间26.7月。随访截止时，所有患者均存活，未见肿瘤复发和转移。<br>　　结论：<br>　　1.TCEB1基因突变型肾细胞癌是较为罕见的肾脏肿瘤，占本研究统计我院2014~2020年3406例肾细胞癌的0.94%，临床上常为偶然发现的肾脏占位，少数可有腰腹部疼痛、尿频尿急等症状。好发于40岁~60岁，男性明显多于女性。TCEB1基因突变型肾细胞癌预后较好，生物学行为多为惰性。<br>　　2.TCEB1基因突变型肾细胞癌病理特征包括：大体边界较清，有纤维性被膜；镜下由胞质透明的肿瘤细胞形成腺泡状、分支管状、乳头状等多种结构，常可见甲状腺滤泡样胶质，伴纤维/平滑肌间质成分。组织学分级常为WHO/ISUP1-2级。<br>　　3.免疫组化示TCEB1基因突变型肾细胞癌呈CAIX弥漫完整膜阳性，CK7和CD10不同程度阳性，AMACR阴性或弱阳性。<br>　　4.TCEB1基因突变型肾细胞癌常为TCEB1基因Y79C突变，少数为E92K、I95N或C112fs突变。不伴有染色体3p缺失。本组高通量基因测序研究发现54.2%病例伴有TSC1/TSC2基因突变；4.2%伴随FGF3基因拷贝数增加。这些新发现的突变可能参与部分TCEB1基因突变型肾细胞癌的发生，并可能有潜在治疗意义。