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摘要目的：大量研究表明γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid，GABA）系统参与重度抑郁症病理机制，是治疗抑郁症的重要潜在靶点。成熟神经元中，钾-氯共转运体2（K+-Cl?cotransporter2，KCC2）是胞内氯离子向胞外转运的主要转运体，在维持神经元胞内低氯状态的过程中发挥着关键作用。A型γ氨基丁酸受体（GABAtypeAreceptor，GABAAR）介导的突触抑制作用主要依赖通道开放后的氯离子内流，KCC2表达缺陷会降低GABAARs通道开放时的氯离子内流驱动力，减弱GABAARs介导的抑制性突触传递。本文探讨KCC2介导的氯离子稳态失衡在慢性应激诱导的抑郁样行为中的作用及机制，为治疗抑郁症提供新靶点。<br>　　方法：慢性社会挫败应激建立抑郁症小鼠模型；社会接触实验（socialinteractiontest，SIT）检测小鼠社交行为；糖水偏好实验检测小鼠奖赏相关行为；新事物认知实验检测小鼠学习记忆功能；旷场实验检测小鼠运动能力；悬尾实验（tailsuspensiontest，TST）、强迫游泳实验（forcedswimmingtest，FST）检测小鼠的绝望行为；免疫蛋白印迹方法检测蛋白的表达；慢病毒（lentivirus，LV）沉默或过表达KCC2的表达；阈下社会挫败应激检测小鼠应激感性；氯离子荧光探针检测神经元胞内氯离子浓度；膜片钳技术记录GABA翻转电位（reversalpotentialforGABA，EGABA）和微小型抑制性突触后电流（miniatureinhibitorypostsynapticcurrents，mIPSCs）；脑立体定位技术，进行病毒注射和埋管给药实验；MTT试剂盒检测细胞凋亡率；超高速离心法提取外泌体；粒径追踪分析和免疫电镜，检测提取物粒径分布及形态；PKH67膜染料试剂盒标记外泌体；共聚焦进行免疫荧光成像；高效液相色谱检测装载布美他尼（bemetanide，Bume）的外泌体（Bume-primedexosome，Bume-Exo）中Bume含量。<br>　　结果：（1）CSDS诱导易感小鼠社会接触比率降低，糖水偏好率降低，在旷场中央区运动时间降低。（2）易感小鼠背侧海马（dorsalhippocampus，dHip）和腹侧海马（ventralhippocampus，vHip）KCC2表达下降。（3）LV沉默dHip脑区KCC2表达（shRNA-KCC2）增加小鼠对应激的易感性。（4）dHip脑区过表达KCC2逆转CSDS诱导的抑郁样行为。（5）易感小鼠神经元胞内氯离子浓度升高，EGABA发生去极化迁移。（6）易感小鼠mIPSCs幅度下降。（7）KCC2-OE有效逆转CSDS诱导的EGABA迁移。（8）KCC2-OE逆转CSDS诱导的mIPSCs幅度的下降。（9）离体脑片孵育Bume逆转CSDS诱导的EGABA去极化迁移。（10）离体脑片孵育Bume逆转CSDS诱导的mIPSCs幅度下降。（11）dHip注射微量Bume改善CSDS诱导的抑郁样行为。（12）Bume孵育RAW264.7细胞提取外泌体，外泌体中TSG101蛋白高表达，无Calnexin蛋白表达，且提取物的粒径分布和形态均符合外泌体标准。（13）高效液相色谱实验发现Bume-Exo中含有Bume。（14）PKH67标记的外泌体在经鼻给药6小时内可分布至包括dHip在内多个脑区。（15）经鼻给予Bume-Exo改善CSDS诱导的抑郁样行为。（16）经鼻给予Bume-Exo逆转CSDS诱导的mIPSCs幅度的下降。<br>　　结论：易感小鼠dHip脑区KCC2表达水平显著下降，神经元胞内氯离子浓度升高，伴随着GABA系统的功能缺陷。沉默dHip脑区KCC2增加小鼠的应激易感性，过表达KCC2逆转CSDS诱导的GABA系统缺陷和抑郁样行为。NKCC1抑制剂Bume能逆转CSDS导致的GABA系统缺陷并改善抑郁样行为。经鼻给予Bume-Exo发挥良好的抗抑郁作用，为抑郁症治疗提供了新的策略。