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NLRP3、Caspase-1、IL-1β在慢性心力衰竭中表达的相关性研究

摘要目的:探讨外周静脉血中NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达程度,与慢性心力衰竭患者(CHF)心功能的关系及其影响因素;探讨心脏组织中Capsase-1、IL-1β的表达程度,与NLRP3(-/-)慢性心力衰竭小鼠心功能的关系。<br>  方法:连续选取2020年12月至2021年6月期间就诊于杭州师范大学附属医院行心脏超声检查的慢性心力衰竭患者50例,根据心衰诊治指南分为HFrEF组17例,HFmrEF组18例,HFpEF组15例;同时连续选取同期就诊于杭州师范大学附属医院且心脏超声检查正常的患者18例为对照组。所有入组患者均留取外周血5ml。收集分析临床样本基线资料、心脏超声结果、实验室检验结果。采用酶联免疫吸附试验的方法,分析外周静脉血中NLRP3、Caspaes-1、IL-1β的表达水平及其影响因素。<br>  健康8周龄雄性C57BL/6小鼠14只分为两组(A、B),健康8周龄雄性NLRP3基因敲除(NLRP3-/-)小鼠14只分为两组(C、D),A与C组诱导构建慢性心力衰竭模型。各组小鼠完善心脏超声检查,处死解剖后取心脏组织,采用心脏组织切片免疫组化染色的方法,分析IL-1β分布及含量水平,同时采用酶联免疫吸附实验的方法,分析心脏组织中Caspase-1、IL-1β的表达水平及影响因素。<br>  结果:1.健康对照组患者外周血浆NLRP3表达量明显低于三组心力衰竭患者(p<0.05),HFrEF组外周血浆NLRP3表达量高于HFmrEF组(14.9±1.2vs.13.2±2.1,p<0.05),HFmrEF组外周血浆NLRP3表达量高于HFpEF组(13.2±2.1vs.11.5±1.8,p<0.05)。<br>  2.酶联免疫吸附实验发现,HFrEF组及HFmrEF组患者外周血浆IL-1β表达量均高于健康对照组(p<0.05),HFrEF组患者外周血浆IL-1β表达量(63.3±6.0vs.56.4±11.1,p<0.05)高于HFmrEF组患者。<br>  3.酶联免疫吸附实验发现,HFrEF组及HFmrEF组患者外周血浆Caspase-1表达量均高于健康对照组(p<0.05),HFrEF组患者外周血浆Caspase-1表达量(85.4±5.1vs.73.4±10.9,p<0.05)高于HFmrEF组患者。<br>  4.正常心力衰竭A组小鼠与正常对照B组小鼠相比,EF及FS均明显降低,p<0.05;NLRP3-/-心力衰竭C组小鼠与NLRP3-/-对照D组小鼠相比,EF及FS均明显降低,p<0.05。<br>  5.NLRP3-/-心力衰竭C组小鼠与正常心力衰竭A组小鼠相比,EF明显升高(52.1±5.1vs.40.7±2.4,p<0.05),FS明显升高(19.3±1.2vs.25.5±3.2,p<0.05),C组小鼠心功能优于A组小鼠。<br>  6.小鼠心脏组织IL-1β免疫组化发现,正常心力衰竭A组小鼠IL-1β表达量明显高于正常对照B组小鼠,NLRP3-/-心力衰竭C组小鼠IL-1β表达量高于NLRP3-/-对照D组小鼠,p<0.05;NLRP3-/-心力衰竭C组小鼠心脏组织IL-1β表达量(39.0±13.5vs.68.6±15.8,p<0.05)明显低于正常心力衰竭A组小鼠。<br>  7.酶联免疫吸附实验发现,A、C两组心力衰竭小鼠IL-1β表达量均高于各自B、D对照组,p<0.05;正常心衰A组小鼠IL-1β含量(55.5±11.3vs.40.0±5.3,p<0.05)高于NLRP3-/-心衰C组小鼠。<br>  8.酶联免疫吸附实验发现,A、C两组心力衰竭小鼠Caspase-1表达量均高于各自对照组,p<0.05;正常心衰A组小鼠Caspase-1含量(27.5±7.8vs.23.1±3.0,p<0.05)高于NLRP3-/-心衰C组小鼠。<br>  结论:1.心力衰竭后NLRP3可有相对的升高,且NLRP3可从一定程度上反应心力衰竭的严重程度。<br>  2.射血分数下降和射血分数中间值的心力衰竭患者外周血Caspase-1、IL-1β表达量会有一定程度的升高,而且随着心衰程度的加重,数值也会随之升高。<br>  3.动物实验中,小鼠心脏组织中IL-1β及Caspase-1表达水平与心力衰竭呈正相关。NLRP3基因敲除后心力衰竭小鼠心脏组织中的Caspase-1、IL-1β表达下降且心功能相对更好。

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