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摘要目的：目前心力衰竭（Heartfailure,HF）仍然是全世界范围内造成死亡的主要原因。心肌纤维化是心力衰竭患者常见的病理现象，是一种持续进展且不可逆转的病理过程，目前尚无有效的治疗药物。心肌纤维化也是多种心脏疾病的病理基础，当心脏损伤或心脏负荷过重时，多种物质引起心肌成纤维细胞活化并且向肌成纤维细胞分化，这一过程在心肌重塑过程中发挥核心作用。在以往的研究中，复方贞术调脂方（FuFangZhenZhuTiaoZhiFang,FTZ），主要作用于脂代谢、糖代谢等代谢途径，对糖尿病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪性肝炎和胰岛素抵抗等代谢性疾病有较好的治疗效果，但其对心脏疾病的治疗作用尚不明确。本课题拟探究FTZ对心肌纤维化的治疗效果并探究其作用机制。<br>　　方法：1.雄性C57BL/6小鼠随机分为五组，假手术组、主动脉弓缩窄术（Transverseaortaconstriction,TAC）组、FTZ低剂量组（1.2g/kg）、FTZ高剂量组（2.4g/kg）和卡托普利组（10mg/kg）。术后8周对小鼠进行超声心动图检测，检测心脏功能指标，评价FTZ对TAC诱导的心脏功能障碍的改善效果。<br>　　2.对不同分组的小鼠心肌组织进行羟脯氨酸（Hydroxyproline,HYP）检测及对石蜡切片进行Hamp;E、Masson、SiriusRed及免疫组织化学染色，以评价心肌纤维化程度。使用qRT-PCR检测纤维化标记物及炎症因子的mRNA水平变化。<br>　　3.用血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,ANG-Ⅱ）和FTZ处理心肌成纤维细胞后，通过细胞划痕实验、CCK-8实验、细胞EdU增殖实验以评价心肌成纤维细胞的迁移与增殖能力。<br>　　4.用ANG-Ⅱ和FTZ处理心肌成纤维细胞后，通过qRT-PCR和WesternBlot实验检测纤维化标记物的mRNA水平变化及蛋白水平的表达变化。<br>　　5.在细胞水平上通过qRT-PCR及WesternBlot实验；动物水平上对小鼠心脏组织的石蜡切片进行免疫组织化学染色，检测心肌纤维化经典调控通路TGFβ1-Smad2/3上蛋白表达的变化，并使用转化生长因子β1（Transforminggrowthfactorβ,TGFβ1）激动剂进行进一步探讨，找到FTZ改善心肌纤维化的具体作用靶点。<br>　　结果：1.术后8周，FTZ给药组小鼠的射血分数、缩短分数以及心尖四腔切面二尖瓣血流速度E/A峰比值明显较TAC组有所回升，说明FTZ可以改善心脏收缩功能及舒张功能障碍。此外，心脏重量/体重及心脏重量/胫骨长的比值下降也表明FTZ减轻了因压力超负荷而引起的心肌肥大。<br>　　2.Hamp;E染色显示TAC组心肌结构排列紊乱，而FTZ可以减轻这种状况。Masson染色和SiriusRed染色可见TAC组心肌组织胶原沉积明显，而FTZ可以显著降低心肌细胞外基质和胶原的沉积。免疫组化染色显示，TAC组心肌组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-smoothmuscleactin,α-SMA）明显增加，而FTZ明显降低α-SMA的表达。与TAC组相比，FTZ明显降低心肌组织内HYP水平。qRT-PCR结果显示，与TAC组相比，FTZ显著下调I型胶原（Alpha2typeⅠcollagen,Col1A2）、Ⅲ型胶原（TypeⅢcollagen,Col3）和结缔组织生长因子（Connectivetissuegrowthfactor,CTGF）mRNA水平，并可以下调炎症因子的mRNA表达水平。<br>　　3.细胞划痕实验、EdU增殖实验和CCK-8实验表明,FTZ可以明显抑制心肌成纤维细胞的迁移和增殖能力。<br>　　4.经ANG-Ⅱ诱导后，心肌成纤维细胞的Col1A2、Col3、α-SMA和CTGFmRNA表达水平显著上调，经FTZ处理后得到抑制。同时，与ANG-Ⅱ组相比，FTZ显著下调Col1A2、Col3和α-SMA的蛋白表达水平。<br>　　5.心肌成纤维细胞经ANG-Ⅱ处理后TGFβ1、p-smad2、p-smad3的蛋白表达明显升高，而FTZ组则明显降低。此外，免疫组化染色显示，TAC组的心肌组织中TGFβ1的表达显著升高，FTZ治疗后得以改善。并且TGFβ1激动剂逆转了FTZ对心肌成纤维细胞迁移、增殖及胶原合成能力的调控作用。<br>　　结论：1.FTZ改善压力超负荷小鼠的心脏功能障碍。<br>　　2.FTZ改善压力超负荷小鼠心肌纤维化及心脏炎症。<br>　　3.FTZ抑制ANG-Ⅱ诱导下心肌成纤维细胞的增殖与迁移能力。<br>　　4.FTZ抑制ANG-Ⅱ处理后心肌成纤维细胞的胶原合成与分泌能力。<br>　　5.FTZ抑制TGFβ1-Smad2/3信号来治疗心肌纤维化。