检索历史 清除

摘要肝癌是全球癌症中高发病率和高死亡率的主要癌症类型之一，对人类健康构成严重威胁。肝X受体（liverXreceptor，LXR）作为核转录因子，在配体作用下与启动子特定序列结合启动靶基因的转录。REPS2（RALBP1associatedEpsdomaincontaining2）作为Ras/Ral途径信号分子被发现以来，在受体介导的内吞作用中扮演着重要角色。临床上，REPS2被认为是前列腺癌和乳腺癌的潜在生物标志物。NgBR（Nogo-Breceptor，NgBR）和LXR均参与胆固醇和脂质代谢。研究表明，LXR在多种癌症（包括肝细胞癌）中发挥抗肿瘤作用，但其机制尚不完全清楚。<br>　　本研究中，我们在REPS2和NgBR启动子上发现了数个LXR结合元件（LXRresponseelements，LXREs)。采用LXR人工合成激动剂（T0901317或GW3965）证实LXR激活可通过促进LXR与LXREs结合增强REPS2和NgBR的转录。进一步利用过表达系统、小干扰RNA或者CRISPR/Cas9敲除系统改变LXR表达可同步影响T0901317对REPS2和NgBR的调控作用。体内研究显示，腹腔注射含T0901317的玉米油10天后，小鼠肝脏中REPS2和NgBR表达明显增加。基于以上实验结果我们认为T0901317以LXRE依赖途径靶向调控REPS2和NgBR表达。接着，我们的研究表明T0901317能够抑制肝癌细胞的生长、迁移和G1期向S期转换，并且这一作用依赖于LXR对REPS2的激活。在机制上，LXR激活诱导REPS2表达的增加抑制了EGF介导的EGFR内吞作用，同时也抑制了相关受体络氨酸激酶（receptortyrosinekinase，RTK）信号通路的活性。在体内实验中LXR对NgBR表达的调控作用也为探索LXR激动剂调节胆固醇代谢与癌症之间的关系提供一定的研究基础。<br>　　综上，本课题确定了LXR激动剂T0901317在体外和体内水平上靶向调节REPS2和NgBR基因的作用。证明了T0901317通过REPS2抑制肝癌细胞的增殖、迁移和细胞周期进程，这种作用是通过REPS2抑制EGF介导的EGFR内吞作用，并进一步抑制下游两种RTK信号通路（AKT/NF-?B和p38MAPK/ERK）完成的。我们的研究为探索LXR激动剂T0901317抑制肝细胞癌的潜在机制提供了新的见解。