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摘要目的：<br>　　本研究旨在采用天然药物成分α-常春藤皂苷（α-Hederin）探究其对人食管鳞癌（ESCC）细胞的增殖、迁移及凋亡的影响，并从ROS-p38 MAPK通路探究其潜在作用机制，为α-常春藤皂苷应用于临床食管鳞癌治疗提供理论依据。<br>　　方法：<br>　　本实验以食管鳞癌细胞KYSE-30作为实验对象进行以下步骤：<br>　　（1）采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测不同浓度（0、20、40、60、80μM）α-常春藤皂苷作用KYSE-30细胞后的增殖抑制率，以探究α-常春藤皂苷对KYSE-30细胞增殖活力的影响。根据 MTT 实验结果，α-常春藤皂苷作用KYSE-30细胞24 h后的IC50值为21.70μM，后续实验将以5、10、20μM依次作为低、中、高剂量水平开展进行。<br>　　（2）采用划痕愈合实验、Transwell实验检测各浓度α-常春藤皂苷对KYSE-30细胞迁移能力的影响。<br>　　（3）采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术来检测各浓度α-常春藤皂苷对KYSE-30 细胞凋亡率的影响，蛋白印迹法检测 KYSE-30 细胞相关凋亡蛋白cleavead caspase 3、cleavead PARP、Bcl-2和Bax的变化水平。<br>　　（4）采用蛋白印迹法检测各浓度α-常春藤皂苷作用后KYSE-30细胞中的p-ERK、t-ERK、p-JNK、t-JNK、p-p38、t-p38、p-ATF2、t-ATF2表达水平；p38抑制剂 SB203580 和常春藤皂苷共同处理 KYSE-30 细胞，采用 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测其凋亡率，蛋白印迹法检测相应p38 MAPK蛋白和相关凋亡蛋白的变化水平。<br>　　（5）采用活性氧探针（DCFH-DA）和流式细胞术检测各浓度α-常春藤皂苷作用后KYSE-30细胞中ROS变化水平；ROS抑制剂NAC和α-常春藤皂苷共同处理KYSE-30细胞，用活性氧探针和流式细胞术检测其ROS变化水平，蛋白印迹法检测其相应p38 MAPK蛋白水平，Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡率的变化。<br>　　结果：<br>　　（1）MTT结果显示，α-常春藤皂苷显著上调KYSE-30细胞的增殖抑制率，且具有浓度和时间依赖性，表明α-常春藤皂苷显著抑制KYSE-30细胞增殖活力（P＜0.05）。<br>　　（2）划痕愈合实验与Transwell实验结果共同显示，α-常春藤皂苷显著降低KYSE-30细胞迁移率，且呈浓度和时间依赖性（P＜0.05），表明α-常春藤皂苷显著抑制KYSE-30细胞的迁移能力。<br>　　（3）Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术显示，α-常春藤皂苷可上调KYSE-30细胞凋亡率；蛋白印迹实验显示，α-常春藤皂苷显著下调KYSE-30细胞中Bcl-2的表达水平，上调Bax、cleaved caspase 3和cleaved PARP的蛋白表达水平。以上结果表明α-常春藤皂苷可诱导KYSE-30细胞发生凋亡（P＜0.05）。<br>　　（4）蛋白印迹结果显示，α-常春藤皂苷作用于KYSE-30细胞后，可上调p-p38、p-ATF2表达水平，且呈浓度依赖性，差异具有统计学意义（均P＜0.05），但对p-ERK、p-JNK表达水平无影响；将SB203580与α-常春藤皂苷共同处理KYSE-30细胞，蛋白印迹结果显示，SB203580可逆转α-常春藤皂苷对p38信号通路的激活（P＜0.05），并且可逆转Bcl-2蛋白水平的下调以及对Bax、cleaved caspase 3和cleaved PARP蛋白表达水平的上调（P＜0.05）。Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术结果显示，SB203580可逆转α-常春藤皂苷所诱导的KYSE-30细胞凋亡率的上调（P＜0.05）。以上结果均表明α-常春藤皂苷通过激活p38信号通路诱导KYSE-30细胞凋亡。<br>　　（5）活性氧流式结果显示，α-常春藤皂苷作用KYSE-30细胞后，可上调ROS水平，且呈浓度依赖性，差异具有统计学意义（均P＜0.01）；将NAC与α-常春藤皂苷共同处理KYSE-30细胞，流式结果显示，NAC可逆转α-常春藤皂苷对ROS水平的上调（P＜0.05）。蛋白印迹结果显示，NAC可逆转常春藤皂苷对p-p38蛋白的上调（P＜0.05）。Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术结果显示，NAC可逆转α-常春藤皂苷诱导细胞凋亡率的上调（P＜0.05）。以上结果表明α-常春藤皂苷通过ROS介导的p38信号通路诱导KYSE-30细胞凋亡。<br>　　结论：α-常春藤皂苷能够抑制KYSE-30细胞的增殖、迁移，促进其凋亡，机制可能与上调ROS-p38 MAPK信号通路有关。该研究可为α-常春藤皂苷应用于临床食管鳞癌治疗提供理论依据。