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线虫SNX-27参与Clathrin不依赖途径内吞后循环的差异性及机制探究

摘要通过内吞作用,细胞将质膜上的膜蛋白转运至胞内,从而维持细胞膜组分的动态平衡,对细胞信号转导、营养摄取、免疫应答等生命活动的正常运行至关重要。内化后的膜蛋白通常会进入内吞-溶酶体系统中进行分选转运,不同的蛋白走向不同的命运。分选连接蛋白(sorting nexins,SNXs)是一类在内吞体分选过程中发挥调控作用的蛋白家族。SNX27是唯一含有PDZ(PSD95,Dlg1,zo-1)结构域的SNX,通过PDZ结构域与货物蛋白直接结合,并以此调控其内吞后分选转运过程。研究表明SNX27参与调控神经元相关受体的循环转运,SNX27的异常与神经疾病息息相关。但目前对SNX27调控的内吞体分选机制的研究还不够透彻,所以探究SNX27调控的内吞体分选机制有助于更好地理解细胞生命活动运行机制,也为相关疾病的治疗提供新线索和新思路。<br>  本研究使用模式生物秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)作为模型,借助共聚焦荧光成像技术探究SNX-27在内吞体分选中发挥作用的机制。首先发现SNX-27直接参与不同特征的CIE途径货物蛋白hTAC和GLUT-1的循环转运。经分析发现与hTAC相比,GLUT-1具有更高的SNX-27依赖性。进一步研究发现GLUT-1的循环转运需要Retromer复合物协助,hTAC则不需要,暗示SNX-27调控不同特征货物蛋白转运存在差异。之后通过共定位分析和RNAi实验发现GLUT-1进入循环路径之前首先到达EEA-1标记的分选内吞体中,表明hTAC与GLUT-1的分选过程发生在早期内吞体的不同微区。最后通过活体动态成像追踪到EEA-1直接参与GLUT-1内吞囊泡向胞内的运输过程。<br>  综上所述,本研究发现线虫SNX-27参与调控CIE途径货物蛋白hTAC、GLUT-1的内吞后循环过程,揭示不同特征货物蛋白的分选差异,为进一步探索SNX-27在内吞体分选过程中发挥作用的机制奠定基础。

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