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摘要泽泻（AlismatisRhizoma）作为一种常见的传统中药，主要用于治疗小便不利、水肿胀满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛和高脂血症等。本课题组前期运用LC-MS/MS技术对泽泻在体内的代谢产物进行了鉴定。然而，泽泻三萜化合物由于存在大量同分异构体，部分体内代谢产物的结构尚不明确。此外，前期研究发现泽泻三萜能够改善高脂血症，然而其降脂作用机理有待进一步阐明。因此，本课题运用LC-MS/MS技术结合定量结构-保留关系（QSRR），对泽泻体内代谢产物进行了精准注释。然后，通过体内药效学、代谢组学、脂质组学、网络药理学和分子对接技术，对泽泻治疗高脂血症的降脂作用机制进行了系统地研究。<br>　　1.基于定量结构-保留关系和质谱特征离子的泽泻体内代谢产物精准注释策略<br>　　本研究基于QSRR结合特征离子，建立了一种中药体内代谢产物精准注释策略，并用于泽泻三萜化合物的研究。该策略包括四个步骤：（1）基于内部数据库初步筛选和确定生物样品中的泽泻三萜原型化合物和代谢产物；（2）利用泽泻三萜的特征离子、化合物数据库或潜在代谢途径确定未知原型化合物和代谢产物的候选结构；（3）建立QSRR模型以预测候选结构的保留时间；（4）将实验保留时间与候选结构的预测值进行匹配来确认未知化合物的结构。本研究采用遗传算法-多元线性回归建立的QSRR模型具有良好的决定系数性（R2=0.9966）。通过该策略，共在大鼠粪便样品中鉴定出118种泽泻三萜化合物，包括47种原型化合物和71种代谢产物，其中61种未知化合物得到了精准注释。该策略可以提高中药体内代谢产物注释的置信度，为阐明泽泻药效物质基础及作用机制奠定了基础。<br>　　2.代谢组学和脂质组学研究泽泻对高脂血症小鼠的治疗作用<br>　　本研究旨在采用代谢组学和脂质组学方法进一步探讨泽泻的降脂机制。该研究方法如下：（1）建立高脂血症小鼠模型，并通过药效学实验以评估泽泻的疗效；（2）采用基于UHPLC-Q-Exactive-MS/MS的代谢组学和脂质组学方法分析血浆样品，并使用多元统计分析方法筛选生物标志物；（3）通过代谢途径分析，揭示泽泻治疗高脂血症可能的作用机制。结果显示，泽泻能够显著回调高脂血症小鼠的血脂水平，并明显改善肝脏的脂质堆积。此外，共筛选出70个与泽泻治疗高脂血症相关的潜在生物标志物，主要涉及花生四烯酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、三羧酸循环和甘油磷脂代谢等。综合代谢组学和脂质组学分析结果，泽泻通过调节脂质代谢、氨基酸代谢和能量代谢来发挥其降脂功效。本研究为泽泻的临床应用提供了研究基础，并为其它中药的作用机制研究提供了参考。<br>　　3.网络药理学结合代谢组学和脂质组学揭示泽泻降脂机制<br>　　本研究在第二章代谢组学和脂质组学研究基础上，进一步采用网络药理学方法阐明泽泻治疗高脂血症的信号通路和治疗靶点。该研究方法如下：（1）运用LC-MS/MS技术检测给药小鼠血浆中的泽泻三萜原型化合物和代谢产物，并以此作为网络药理学研究的化学信息数据库；（2）通过网络药理学分析，筛选出泽泻治疗高脂血症的潜在靶点，并进行网络拓扑分析；（3）采用GO功能注释和KEGG通路富集，以揭示泽泻治疗高脂血症所调控的基因功能与信号通路；（4）通过构建成分-靶点-代谢物网络，将网络药理学与代谢组学和脂质组学的分析结果相整合，筛选出泽泻治疗高脂血症的关键靶点；（5）采用分子对接、实时荧光PCR和免疫印迹技术对关键靶点进行验证。通过以上研究，在灌胃泽泻提取物的小鼠血浆中鉴定出18个入血成分，并筛选出83个泽泻治疗高脂血症的潜在靶点。泽泻主要通过调控PPAR信号通路、调节脂肪细胞中的脂肪分解、胰岛素抵抗和AMPK信号通路等关键通路起到治疗高脂血症的作用。基于成分-靶点-代谢物网络，筛选出6个泽泻治疗高脂血症的关键靶点。分子对接结果显示，泽泻入血成分与这些关键靶点具有较高的亲和力。实时荧光定量PCR表明泽泻能够逆转这些关键靶点在肝脏的mRNA表达。此外，免疫印迹试验进一步证实泽泻能够调控脂质代谢相关关键靶点的表达。本研究将网络药理学与代谢组学、脂质组学相结合，揭示了泽泻对内源性代谢物的调控作用，并验证了关键治疗靶点。