检索历史 清除

摘要目的：排斥反应是影响心脏移植术后移植物长期存活的关键因素，目前免疫抑制剂是术后抗排斥的主要选择，也的确为术后移植物长期存活提供了重要保障，但是免疫抑制剂的持续使用也给机体带来了相当大的副作用，寻找到一条即能抑制排斥反应，又能减小副作用，延长心脏移植存活时间的道路是器官移植研究者不断追求的目标。树突状细胞（Dendritic Cell，DC）作为功能最强大的抗原提呈细胞，在移植排斥反应中发挥着巨大的作用，抑制DC功能，诱导DC向免疫耐受方向分化，减弱DC对T细胞和B细胞的激活能力，对心脏移植术后抗排斥反应极为重要。己糖激酶2（Hexokinase2，HK2）作为糖酵解途径的关键酶，调控着细胞的能量代谢，本研究试图通过抑制DC的HK2活性，影响DC能量代谢，诱导DC向免疫耐受型转化，从而延长同种异体小鼠心脏移植存活时间。<br>　　方法：通过HK2抑制剂3-溴丙酮酸盐（3-Bromopyruvate，3-BrPA）体外抑制细胞因子诱导BALB/C小鼠骨髓DC分化，流式细胞学技术检测DC表面成熟度相关标志表达和细胞因子分泌能力。将骨髓来源的BALB/C小鼠DC用3-BrPA处理后与C57BL/6小鼠脾脏T细胞按1:10混合培养，建立同种异体急性排斥反应模型，流式细胞学技术检测T细胞的增殖和活化能力。体内实验中，BALB/C小鼠作为供体，将其心脏移植到C57BL/6小鼠腹腔，建立同种异体小鼠心脏移植模型，实验组给与腹腔注射3-BrPA，观察小鼠移植心脏存活时间，绘制小鼠心脏移植生存曲线，并取材移植物做免疫组化和HE染色观察炎症浸和心肌损伤情况。<br>　　结果：体外实验结果提示，3-BrPA抑制DC的HK2表达后，DC分化成熟度降低，抑制炎性细胞因子分泌能力增强。3-BrPA处理后的DC抗原提呈能力下降，对T细胞激活和增殖能力减弱。体内实验表明，腹腔注射3-BrPA后小鼠心脏移植存活时间增加，移植物炎症反应减弱，心肌损伤较轻，DC浸润减少。<br>　　结论：抑制DC的HK2后，DC能量代谢发生改变，分化成熟过程受到影响，使DC向耐受性DC方向分化，减弱其抗原提呈能力，T细胞增殖和激活被抑制，减轻小鼠心脏移植炎症反应，延长小鼠心脏移植存活时间，从DC能量代谢的角度抑制心脏移植排斥反应，为心脏移植术后抗排斥反应提供了新的思路。