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摘要目的：本研究拟探讨 P4HA1 在食管鳞状细胞癌中的作用及机制，同时探讨 STAT1是否能够转录激活P4HA1促进食管癌的进展。寻找食管癌新的生物标志物和新的治疗靶点。<br>　　方法：1）收集2008年3月至2017年12月，就诊于新疆医科大学第一附属医院手术切除并经病理确诊为食管鳞状细胞癌的 237 例患者完整的临床及病理资料。在食管鳞状细胞癌和癌旁正常粘膜的蜡块中选取最具代表性区域用于制做组织芯片。组织学标本用于HE切片及免疫组化染色，临床及病理资料用于P4HA1与临床病理指标的相关性分析。2）采用qRT-PCR、Western Blot检测人食管上皮细胞及EC各细胞株中P4HA1本底表达水平。构建P4HA1低表达EC细胞株，qRT-PCR、Western Blot法筛选出P4HA1表达相对较高的细胞株。CCK8实验、平板克隆实验、EdU实验用于检测转染si-P4HA1细胞后EC细胞株的增殖能力，流式细胞术用于检测转染si-P4HA1后EC细胞株的凋亡水平。Western Blot法检测转染si-P4HA1后EC细胞株的胶原蛋白 COL1A1、COL4A1 的表达情况。利用小鼠皮下成瘤实验检测皮下注射sh-P4HA1后对小鼠成瘤能力的影响。裸鼠成瘤组织中P4HA1、Ki67、COL4A1表达使用 IHC 法测定。裸鼠成瘤组织中的胶原纤维、细胞凋亡水平使用 Masson、TUNEL染色进行检测。3）采用染色质免疫沉淀法（ChIP）及酵母单杂交法（Y1H）、双荧光素酶法检测STAT1及STAT3是否能够结合到P4HA1启动子上。qRT-PCR、Western blot 检测 si-STAT1、si-STAT1+oe-P4HA1 后 STAT1 与 P4HA1 表达量。si-STAT1+oe-P4HA1后，使用EdU法、CCK8法、平板克隆法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western Blot实验检测胶原蛋白CoL1A1、CoL4A1蛋白的表达。<br>　　结果：1）P4HA1在食管鳞状细胞癌组织中表达阳性率为68.7%（163/237），在癌旁组织中均呈阴性表达，其表达在食管鳞状细胞癌患者中明显升高。P4HA1 在食管癌中表达水平及其与临床病理参数的关系的比较中发现：P4HA1 的表达与肿瘤分化程度（χ2=14.973、P=0.01）、肿瘤发生部位（χ2=6.328、P=0.042）、淋巴结转移（χ2=31.625、Plt;0.01）、TNM分期（χ2=7.892、P=0.048）有关。单因素生存分析显示影响食管癌患者 OS 的预后因素有：肿瘤分化程度（χ2=7.117、P=0.028）、淋巴结转移（χ2=16.328、P=0.01）、P4HA1高表达（χ2=16.529、P=0.01）。多因素COX回归生存分析显示：影响食管癌患者OS独立预后因素有P4HA1高表达（HR=2.234、P=0.001、95.0%CI：1.310～3.810）、淋巴结转移（HR=1.677、P=0.001、95.0%CI：1.146～2.454）。Kaplan-Meier方法进行单因素生存分析，影响食管癌患者PFS的预后因素有：肿瘤分化程度（χ2=7.293、P=0.026）、淋巴结转移（χ2=18.869、P=0.001）、P4HA1高表达（χ2=19.278、P=0.001）。多因素COX回归分析提示PFS独立预后因素有淋巴结转移（HR=1.753、P=0.004、95.0%CI：1.1498～2.564）、P4HA1高表达（HR=2.342、P=0.002、95.0%CI：1.378～3.980）。2）P4HA1在食管癌细胞系中高表达。si-P4HA1后EC细胞的增殖水平显著下降，细胞凋亡率升高。胶原蛋白COL1A1、COL4A1的水平显著降低。小鼠皮下成瘤组织的生长被显著抑制。成瘤组织中Ki67、P4HA1、COL4A1的表达显著降低。胶原纤维明显减少、细胞凋亡率升高。3）STAT1可以结合到P4HA1启动子上，激活并促进了P4HA1的表达。STAT3可以直接结合到P4HA1启动子上。si-STAT1后STAT1与P4HA1的蛋白表达水平显著降低。敲低STAT1同时过表达P4HA1后，可以逆转si-STAT1所导致的P4HA1表达量下调、细胞增殖能力下调、CoL1A1及CoL4A1蛋白表达下调，可以逆转si-STAT1所导致的细胞凋亡率升高。<br>　　结论：P4HA1在食管鳞状细胞癌组织的高表达，且P4HA1的表达与肿瘤分化程度、肿瘤发生部位、淋巴结转移、TNM分期有关。P4HA1是影响食管鳞状细胞癌患者总生存期及无进展生存期的独立预后因素。P4HA1 在 EC 细胞中表达升高，沉默P4HA1显著抑制EC细胞增殖和胶原合成，同时增加细胞凋亡。小鼠皮下注射sh-P4HA1细胞显著抑制了小鼠皮下肿瘤组织的生长。成瘤组织中的胶原纤维明显减少，肿瘤细胞凋亡率升高。STAT1可以转录激活P4HA1，促进EC细胞增殖和胶原生成，并抑制细胞凋亡，促进 ESCC 进展。STAT1 可能正向调控 P4HA1的表达。