摘要目的:胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是中枢神经系统最常见、侵袭性最强的原发性恶性肿瘤,在所有胶质瘤中死亡率最高。GBM被世界卫生组织(WHO)归类为IV级星形细胞瘤,预后极差。尽管标准治疗方案包括手术切除、放射治疗和替莫唑胺(TMZ)辅助化疗,但GBM仍然对患者的生命构成重大威胁。肿瘤微环境中的免疫细胞在GBM免疫抑制性肿瘤微环境的形成中扮演着重要角色。通过探索与肿瘤免疫浸润相关的新预后特征和阐明星形细胞瘤的分子机制,提高胶质母细胞瘤(GBM)患者预后的准确性并制定更有效的治疗策略在GBM治疗领域至关重要。细胞黏附素(Cytohesin)家族成员已被证实能够作为肿瘤的预后标志物,并广泛参与肿瘤进展。充分评估细胞黏附素家族成员与GBM之间的相关性极具必要性。<br> 方法:本研究基于CGGA、TCGA、GEO、及HPA等多个开放性公共数据库和UCSC、GEPIA等在线网站,全面且充分地评估了细胞黏附素家族成员在胶质瘤中的表达水平和预后价值。单因素和多因素Cox回归分析提示年龄、WHO等级及细胞黏附素-4(Cytohesin-4,CYTH4)表达量是胶质瘤的独立预后因素。基于此,构建了胶质瘤的预测模型即列线图,并经一致性指数及校准曲线进行验证。在选择CYTH4作为目标基因进行进一步研究后,首先利用多数据集及本研究所收集的临床样本验证CYTH4在GBM中的表达及预后价值。分析确定了CYTH4的表达水平与GBM中特定基因组改变之间存在关联。利用单样本基因集富集分析、ESTIMATE评分、TIMER网站及TISIDB网站充分评估CYTH4与GBM免疫细胞浸润丰度及免疫标记分子之间的相关性。CYTH4与溶细胞活性(CYT)评分及T细胞炎症基因表达谱(GEP)之间的相关性也得到证实。GSEA软件及R软件中的“ClusterProfiler”R包用于挖掘CYTH4在GBM中发挥作用的可能通路。细胞功能实验则进一步确认CYTH4在GBM中所发挥的作用。<br> 结果:细胞黏附素家族成员CYTH4在胶质瘤中表达上调,随WHO等级升高其表达量也相应增加。CYTH4表达量、年龄及WHO分级是胶质瘤患者的独立预后因素,基于此构建的预测模型具有良好的准确性和适用性。CYTH4在GBM中的表达上调得到多数据库及临床样本的证实,并且同样预示着患者预后不良。GBM样本存在的拷贝数变异(CNVs)和体细胞突变表现出与CYTH4表达量之间存在相关性。此外,CYTH4与GBM肿瘤免疫细胞浸润及免疫相关标记物具有显著相关性。功能富集分析结果进一步表明CYTH4参与GBM免疫过程,并还与细胞迁移、JAK/STAT通路及Toll样信号通路等机制相关。细胞功能实验进一步证实CYTH4参与GBM的细胞迁移。<br> 结论:<br> 1CYTH4可能在胶质瘤特别是GBM中表达上调,并预示患者预后不良。<br> 2CYTH4可能与GBM基因组改变之间具有潜在联系。<br> 3CYTH4可能与GBM肿瘤免疫浸润存在显著相关性。<br> 4CYTH4可能通过细胞粘附、JAK/STAT通路等机制影响GBM进展。<br> 5沉默CYTH4能够抑制GBM肿瘤细胞迁移。
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