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多功能水凝胶基敷料的制备及其在组织损伤修复中的应用研究

摘要近年来,由于全球人口老龄化及慢性疾病患病率的上升,尤其是患有糖尿病等慢性疾病的老年患者手术后更易出现伤口的延迟愈合和不愈合,从而导致感染风险增加和肢体活动障碍等并发症,使慢性伤口的发病率也逐渐提升。目前,在临床上应用最广泛的还是传统的伤口敷料(如纱布、绷带和敷贴等)。虽然传统敷料能保护伤口,但是容易被伤口部位的渗出液浸透和污染,可能会出现伤口感染的风险。此外,传统敷料容易粘连伤口部位的组织,在患者换药时引起疼痛反应和二次创伤等问题,以及存在不隔菌、不保温和不保湿等缺点。因此,传统伤口敷料的临床应用效果欠佳,目前已不能满足临床上大量且多样化的伤口治疗需求。<br>  自1962年英国科学家Winter博士首次提出了湿性伤口愈合理论以来,推动了各种结构和功能的新型医用伤口敷料的发展。其中,水凝胶由于其良好的亲水性和优异的生物组织相容性而成为伤口敷料类型中最具竞争力的候选材料。研究报道了有多种方法用来制备多功能水凝胶基的伤口敷料,例如构建相互渗透的聚合物网络、整合多层水凝胶,以及将功能性成分(如具有抗菌活性的分子/官能团或纳米颗粒)嫁接到聚合物支架的主链上,来开发多成分的水凝胶敷料。然而,这些多成分混合水凝胶的制备过程包括多个连续的步骤,需要精细的反应条件,反应过程复杂且耗费时间。因此,通过简单快速的方法来制备具有良好力学性能、优异生物相容性,以及固有抗菌性和抗氧化性的水凝胶敷料来有效促进伤口愈合仍然是一个重要的科学问题。<br>  基于以上问题我们开展了以下工作:<br>  1. 针对水凝胶基敷料制备方法复杂和力学性能弱的问题。我们基于可大规模制备的“一锅法”策略将力学性能优异和生物相容性良好的天然的水解弹性蛋白(ELN)引入到聚丙烯酰胺(PAAm)网络中,开发了一种能快速制备的PAAm-ELN1.0多功能水凝胶敷料贴片。通过扫描电子显微镜对水凝胶敷料的表面形态进行表征,以及对水凝胶敷料的溶胀性能、力学性能、粘附性能进行系统表征。PAAm-ELN1.0水凝胶贴片具有与人体皮肤类似的杨氏模量、高拉伸性、优异的弹性和自恢复性,使其与伤口愈合过程中皮肤的应力应变完美兼容,有效覆盖伤口。此外,选用小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)和SD大鼠的红细胞对PAAm-ELN1.0水凝胶敷料的生物相容性进行评价,结果表明其具有良好的生物相容性。最后,通过SD大鼠全层皮肤缺损模型,对水凝胶敷料促进皮肤伤口愈合效果进行验证。PAAm-ELN1.0水凝胶敷料能促进伤口部位新生血管和毛囊的增生,加速胶原蛋白沉积,有效促进伤口愈合,效果明显优于商业敷贴3M Tegaderm敷贴,证明其具有较大的临床应用前景。<br>  2. 针对水凝胶基敷料制备方法复杂和缺乏固有抗菌性和抗氧化性的问题。我们基于可大规模制备的“一锅法”策略将天然的单宁酸(TA)和壳聚糖(CS)引入到聚丙烯酰胺(PAAm)网络中,开发一种能快速制备的PAAm-ELN1.0-TA0.2-CS0.06多功能水凝胶敷料贴片。通过扫描电子显微镜对水凝胶敷料的表面形态进行表征,以及对水凝胶敷料的溶胀性能、力学性能、粘附性能进行系统表征。PAAm-ELN1.0-TA0.2-CS0.06水凝胶敷料具有与人体皮肤相似的杨氏模量,该水凝胶可以反复自粘在皮肤表面,能保持约55 kPa的生物组织粘合强度,去除后不会留下残留物或造成创伤。此外,选用小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)和SD大鼠的红细胞对PAAm-ELN1.0-TA0.2-CS0.06水凝胶敷料的生物相容性进行评价,结果表明其具有良好的生物相容性。同时,选用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌对其抗菌性能进行评价,结果表明其具有良好的抗菌性。此外,采用DPPH法和活性氧试剂检测盒对其抗氧化性进行评价,结果表明就有良好的抗氧化效果,能有效清除自由基。最后,通过SD大鼠全层皮肤缺损模型,对水凝胶敷料促进皮肤伤口愈合效果进行验证。PAAm-ELN1.0-TA0.2-CS0.06水凝胶敷料能促进伤口部位新生血管和毛囊的增生,加速胶原蛋白沉积,有效促进伤口愈合,效果明显优于商业3M Tegaderm敷贴,其在皮肤创面的修复和再生方面发挥了重要作用。<br>  3. 针对水凝胶基敷料导电性能弱,缺乏传感性的问题。我们将电解质氯化钠(NaCl)引入PAAm-ELN-TA-CS水凝胶体系中,基于可快速制备的“一锅法”的策略开发了PAAm-ELN1.0-TA0.2-CS0.06@NaCl导电的水凝胶敷料贴片,其具有优异的生物组织相容性、粘附性、高导电性和灵敏性。能够将PAAm-ELN1.0-TA0.2-CS0.06@NaCl导电水凝胶贴片直接粘附在灵活的和动态的生物组织表面,作为表皮传感器,通过采集电信号,能实时监测人体的运动,采集运动信号,为个性化的医疗奠定了一定的基础。为多功能伤口敷料和柔性可穿戴表皮传感器的开发提供了思路。

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