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摘要肺癌是发病率仅次于乳腺癌的全球第二大恶性肿瘤，在其多种病理组织学亚型中腺癌的占比最高，约为40%。肺腺癌具有高度侵袭和转移性，多数患者确诊时已属晚期，导致预后不佳，平均生存期不到5年，因此开发肺癌诊治的新方法非常重要。冷诱导RNA结合蛋白（cold-inducible RNA-binding protein， CIRBP）因其参与低温刺激诱导的应激反应而得名。近年来，大量研究表明CIRBP还参与多种肿瘤的发生发展，其表达水平可以预测部分肿瘤患者的预后。但是截至目前，我们对CIRBP在肺腺癌中的作用还知之甚少。<br>　　目的：通过体外细胞实验构建过表达CIRBP基因肺腺癌细胞株、免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）实验检测肺腺癌组织中CIRBP水平、酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测肺腺癌患者血清CIRBP水平，观察过表达CIRBP基因对肺腺癌细胞凋亡、侵袭和增殖功能的影响，了解其组织学和血清学特点，探讨CIRBP在肺腺癌中的作用，以期为CIRBP在肺腺癌的早期诊断和精准治疗等方面的临床应用提供理论依据。<br>　　方法：1.应用实时荧光定量核酸扩增检测法（ quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测CIRBP基因在人肺腺癌PC-9、H125、NCI-H1975、A549、Calu-3细胞中mRNA的表达丰度。2.将人肺腺癌A549和PC-9细胞分为阴性对照（negative control，NC）组和过表达（overexpression， OE）组，使用阴性对照病毒和过表达CIRBP基因的慢病毒分别转染。72小时后使用qPCR法检测CIRBP基因表达情况。3.通过Annexin V-APC单染法细胞凋亡实验、细胞体外侵袭（Transwell）实验和CCK-8细胞计数（Cell Counting Kit-8）实验观察过表达CIRBP基因对肺腺癌细胞凋亡、侵袭和增殖功能的影响。4.应用IHC实验检测兰州大学第二医院病理科保存的24例肺腺癌患者肿瘤组织和对应正常组织标本的CIRBP表达情况。5.收集兰州大学第二医院胸外科收治的64例肺腺癌患者的血液样本及相关临床数据，同期招募24例体检健康的志愿者为健康对照组。应用 ELISA 实验检测受试者的血清样本中的 CIRBP 水平。分析描述88例受试者的一般资料和临床病理资料，按疾病、性别、年龄、TNM分期、临床分期、发病部位、肿瘤标志物等分组，分析血清CIRBP水平与多种临床病理特征的关系和在肺腺癌中的诊断价值。<br>　　结果：1.qPCR检测结果显示CIRBP基因mRNA在人肺腺癌PC-9、H125、NCI-H1975、A549、Calu-3细胞中均呈高表达。2.感染人肺腺癌A549和PC-9细胞后72小时用显微镜观察见NC组与OE组细胞均状态良好，未出现大量死亡，感染率达到80%，可用于后续实验。qPCR检测结果示，在A549细胞中OE组CIRBP基因的表达丰度是NC组的3.260倍（P＜0.05），在PC-9细胞中OE组CIRBP基因的表达丰度是NC组的4.248倍（P＜0.05）。3.细胞凋亡实验结果显示，在A549和PC-9细胞中，OE组细胞凋亡率均明显低于NC组（P＜0.05）；Transwell实验结果示，在A549和PC-9细胞中，OE组细胞迁移数和变化倍数均明显高于NC组（P＜0.05）；CCK-8细胞计数实验结果显示，在A549和PC-9细胞中，OE组的细胞数和增殖倍数均明显高于NC组（P＜0.05）。4.IHC实验结果显示，肺腺癌组织样本中CIRBP的表达水平高于正常组织（P＝0.05）。CIRBP主要存在于肺腺癌细胞的胞质中。在分化程度越差的肺腺癌细胞中， CIRBP的表达水平越高。5.ELISA实验结果显示，肺腺癌患者的血清CIRBP浓度高于正常人（P＜0.05）；使用血清CIRBP浓度诊断肺腺癌的灵敏度为40.6%，特异度为95.8%，准确度为56.8%；男性患者的血清CIRBP浓度高于女性患者（P＜0.05）；年龄对血清CIRBP浓度的差异影响无统计学意义（P＞0.05）；T、N、M分期对血清CIRBP浓度的差异影响有统计学意义（P＜0.05）；临床分期对血清CIRBP浓度的差异影响有统计学意义（P＜0.05）；发病部位对血清CIRBP浓度的差异影响无统计学意义（P＞0.05）；CEA浓度与血清CIRBP浓度存在正相关（P＜0.05），NSE、CYFRA21-1、Pro-GRP和SCC浓度对血清CIRBP浓度的差异影响无统计学意义（P＞0.05）。<br>　　结论：1.CIRBP基因mRNA在人肺腺癌PC-9、H125、NCI-H1975、A549、Calu-3细胞中高表达。2.慢病毒转染是一种可行的CIRBP基因过表达肺腺癌细胞株构建方法。3.在体外，人肺腺癌A549、PC-9细胞中CIRBP基因的表达水平升高后可导致肿瘤细胞的增殖和侵袭能力提高、凋亡率下降。4.CIRBP在人肺腺癌细胞的胞质中高表达，在胞核和正常组织中低表达，其表达增高与肺腺癌的恶性程度相关。5.高水平的血清CIRBP有望成为肺腺癌诊断的生物标志物。性别、TNM分期、临床分期、CEA浓度是肺腺癌患者血清CIRBP浓度的影响因素，年龄、NSE、CYFRA21-1、Pro-GRP和SCC浓度不是肺腺癌患者血清CIRBP浓度的影响因素。