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摘要人非小细胞肺癌( non-small cell lμng cancer，NSCLC) 是肺癌中最常见的类型，约占肺癌总人数80%。目前临床治疗方式有手术治疗、药物治疗、放疗，药物治疗仍是主要治疗手段，临床现有非小细胞肺癌药物不良反应较多，研发更加安全、有效、稳定、可控的药物对治疗NSCLC具有重大意义。<br>　　小叶黄杨（Buxus microphylla）是黄杨科（Buxaceae）黄杨属（Buxus）植物，本论文以小叶黄杨的干燥叶为研究对象，对小叶黄杨的提取工艺进行优化、活性成分进行分离纯化、结构确证及体外抑制非小细胞肺癌A549细胞的活性等实验进行研究，结果如下：<br>　　1. 筛选出了小叶黄杨的最佳提取工艺<br>　　采用CCK-8法确定了小叶黄杨抗非小细胞肺癌A549作用的活性部位为干燥叶；单因素、正交试验筛选出小叶黄杨最佳提取条件为：75%乙醇以料液比为1:10混合，回流提取3次，每次2 h。<br>　　2. 完成了小叶黄杨叶有效成分的分离纯化<br>　　通过溶剂萃取法、CCK-8 法，确定小叶黄杨干燥叶活性组分为石油醚相和三氯甲烷相；再利用硅胶柱层析、薄层色谱法、重结晶法分离活性成分，共得到4个活性单体化合物，化合物1-4体外抑制非小细胞肺癌A549细胞IC50值分别为24.48?0.75μg/ml、53.01?1.73 μg/ml、19.07?0.46 μg/ml、28.55?0.81 μg/ml。<br>　　3. 弄清楚了小叶黄杨叶中有效成分的结构<br>　　4个有效单体化合物经波谱解析确证为：羽扇豆醇、白桦脂醇、羟基环原黄杨碱、羟基环原黄杨碱酯，其中羟基环原黄杨碱、羟基环原黄杨碱酯为新衍生物。<br>　　4. 开展了羟基环原黄杨碱对A549细胞增殖抑制活性的初步研究<br>　　非小细胞肺癌A549细胞用羟基环原黄杨碱处理24 h后，部分细胞形态发生改变，细胞体积缩小变圆，随着给药浓度的增加形态改变的细胞增多，并伴随细胞碎片产生，其IC50值为20.06?1.87 μg/ml。划痕试验、transwell迁移及侵袭试验的研究结果显示羟基环原黄杨碱在12.5 μg/ml至50 μg/ml浓度范围内呈剂量依赖性地抑制A549细胞的迁移和侵袭，与Control组相比均呈显著性差异。细胞周期、细胞凋亡和Caspase3活性检测试验结果表明，随着药物浓度的升高A549细胞凋亡和Caspase 3表达增多，其中早期凋亡增多较为明显，在12.5 μg/ml至50 μg/ml浓度范围内呈剂量依赖性，其作用机制可能和阻滞细胞周期在G0/G1期，上调A549细胞中凋亡蛋白caspase 3的表达，从而诱导细胞凋亡。提示羟基环原黄杨碱可抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭，并诱导其凋亡，为黄杨类生物碱抗肺癌作用提供了一定试验依据。