摘要研究目的:本研究主要选取在四川省人民医院行首次肝移植的患者,利用数字化PCR技术提取其血液,尿液样本中供受者cfDNA拷贝量,验证三个问题。一是探究尿液样本的稳定性,二是研究尿液样本和血液样本其ddcfDNA是否具有相关性,三是探究血液样本ddcfDNA是否与移植肝功能具有相关性。研究方法:按照一定纳入排除标准选取肝移植患者25名。利用数字化PCR检测其血液,尿液样本中供受者cfDNA的拷贝数。利用变异系数CV及相关系数R分析其样本的稳定性及相关性。研究结果:1、同一尿液样本其ddcfDNA拷贝数较少,受者cfDNA拷贝数相对较多,但供受者cfDNA重复性好。2、立即采集的尿液样本中供受者cfDNA拷贝数最高,低温往往能保持cfDNA稳定,常温时供受者cfDNA常会出现降解。3、在同一天中,晨尿中的供受者cfDNA拷贝数最多。4、血液ddcfDNA与传统血液生化指标具有线性关系。5、尿液样本ddcfDNA与血液样本ddcfDNA无相关性。最终结论:肝移植患者尿液样本中的ddcfDNA拷贝数较少,其稳定性较差,在常温,长时间保存下会发生降解。在采集尿液样本配合ddcfDNA相关检验时,最好采集晨尿标本后立即送检,所得供受者cfDNA拷贝数最高。但尿液样本ddcfDNA与血液样本中ddcfDNA并无明显相关性,因此,不推荐使用尿液样本代替血液样本进行ddcfDNA相关检测。同时验证了血液样本中ddcfDNA拷贝量与传统肝生化指标具有线性关系,ddcfDNA有望成为临床医师判断移植物损伤全新参考指标,更好地指导患者移植术后的后续治疗。
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