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摘要目的：<br>　　探究miR145-5p靶向HMGB3调控Notch信号通路对NSCLC细胞增殖和凋亡的影响，为NSCLC探索新的治疗靶点。<br>　　方法：<br>　　1.在NSCLC癌组织和癌旁组织中应用免疫组化法检测HMGB3的表达；在NSCLC细胞A549和H520中应用Western blot检测HMGB3的表达情况。<br>　　2.构建HMGB3的小干扰RNA（siRNA），应用Western blot筛选出干扰效果最佳的siHMGB3，将siHMGB3通过脂质体转染的方式转染到A549和H520细胞中，CCK8法用于检测转染成功后细胞的增殖活性，流式细胞术用于检测细胞凋亡水平。<br>　　3.应用Targetscan数据库预测靶向HMGB3的miRNA，确定了miR145-5p 与 HMGB3 的结合位点，并在 NSCLC 细胞中运用 qRT-PCR 检测miR145-5p的表达情况。构建携带有miR145-5p和下游靶mRNA HMGB3的结合位点的野生型质粒（HMGB3-3’UTR-WT）和对其结合位点进行了突变的突变型质粒（HMGB3-3’UTR-MUT），将两种质粒分别与miR145-5p mimic及其NC共转染到A549细胞中，验证二者间的结合关系。通过Western blot检测miR145-5p变化对其靶点HMGB3的影响。<br>　　4.将miR145-5p inhibitor NC、miR145-5p inhibitor+siNC、miR145-5p inhibitor+siHMGB3分别转染到A549和H520细胞中，用CCK8法和流式细胞术观察转染后的NSCLC细胞增殖和凋亡的变化。<br>　　5.应用Western blot检测NSCLC细胞系中Notch1蛋白的表达水平，以探究miR145-5p/HMGB3轴对Notch信号通路的调控作用。<br>　　结果：<br>　　1. HMGB3在NSCLC癌组织和细胞株中表达水平升高。<br>　　2.CCK8法结果表明，下调HMGB3的表达使A549和H520细胞的增殖能力受到抑制。流式细胞术表明，敲低HMGB3促进了A549和H520细胞的凋亡。<br>　　3. qRT-PCR结果表明，miR145-5p在NSCLC细胞中低表达，双荧光素酶报告基因实验证实了 miR145-5p 与 HMGB3 间的直接结合关系。Western blot结果表明，过表达miR145-5p会降低NSCLC细胞内HMGB3的蛋白水平，而下调miR145-5p后趋势则相反。<br>　　4. CCK8法和流式细胞术结果表明，下调miR145-5p不仅诱导NSCLC细胞的增殖能力增加，而且引起NSCLC细胞凋亡的减少。敲低HMGB3逆转了下调miR145-5p表达对NSCLC细胞增殖、凋亡的影响。<br>　　5. Western blot结果表明，miR145-5p靶向HMGB3调控Notch1的蛋白表达水平，激活Notch信号通路。<br>　　结论：<br>　　1. HMGB3 水平在 NSCLC 癌组织和细胞株中显著升高，在 NSCLC细胞中发挥促癌作用。<br>　　2. miR145-5p负调控HMGB3，通过抑制Notch1蛋白表达抑制Notch信号通路激活，从而在 NSCLC 细胞中起到抑制增殖、促进凋亡的作用。