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摘要创伤性脑损伤（traumaticbraininjury,TBI）是指由外部机械力(例如爆炸或碰撞)引起的脑损伤，是成人死亡和残疾的主要原因。TBI病理生理过程中主要包含两个重要成分，即为原发性损伤和继发性损伤，其中继发性损伤通常以慢性神经炎症为主。星形胶质细胞是颅内分布最为广泛的细胞类型，参与中枢神经系统稳态维持，在健康的中枢神经系统中具有多种功能并参与多种中枢系统疾病。星形胶质细胞在TBI后以多种机制做出反应，具有双重作用，包括神经炎症、脑水肿、BBB破坏、神经发生和突触发生等。<br>　　延长因子TuGTP结合域蛋白2（ElongationfactorTuGTPbindingdomaincontainingprotein，Eftud2）是一种剪切体GTP酶，通过调节剪接体的剪切功能进而调控相关基因的表达，已有研究将其确认为先天免疫的新型调节因子。然而Eftud2对炎症状态下的星形胶质细胞是否具有调控作用尚未见报道。<br>　　目的：本课题探究Eftud2对星形胶质细胞的炎症反应是否具有调控的作用及相关机制。<br>　　方法：体内实验选用C57BL/6小鼠，采用控制性皮层撞击损伤（controlledcorteximpact,CCI）模型进行建模，分别于损伤后第1、3、5、7天进行疲劳转棒实验及平衡木实验评估小鼠运动功能变化，用免疫荧光染色验证是否建模成功。建模成功后于TBI第3天进行取材，用免疫荧光染色观察损伤前后S100β和Eftud2荧光强度变化，实时荧光定量聚合酶链反应（Real-timeQuantitativePolymeraseChainReaction，RT-qPCR）检测损伤前后组织中炎性因子在转录水平的变化。<br>　　体外试验中，使用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激星形胶质细胞系（MA细胞系）模拟炎性状态。使用小干扰RNA（smallinterferingribonucleicacid,siRNA）敲低MA细胞中的Eftud2，通过蛋白质免疫印迹（Westernblot,WB）、RT-qPCR、免疫荧光染色实验验证敲低效果。达到满意敲低效果后用LPS刺激MA细胞，RT-qPCR检测MA细胞中各炎性因子在转录水平的变化，WB检测MA细胞中各蛋白表达量变化，免疫荧光染色检测单细胞Eftud2荧光强度及MA细胞体积变化。构建质粒并使用短发夹RNA（shorthairpinribonucleicacid,shRNA）过表达MA细胞中的Eftud2，通过蛋白质免疫印迹（Westernblot,WB）、RT-qPCR、免疫荧光染色实验验证敲低效果。达到过表达效果后用LPS刺激MA细胞，RT-qPCR检测MA细胞中各炎性因子转录水平变化，WB检测MA细胞中各蛋白表达量变化，免疫荧光染色检测单细胞Eftud2荧光强度及MA细胞体积变化。<br>　　结果：在体内实验中，与sham组相比，TBI1dpi、3dpi、5dpi、7dpi组免疫荧光染色S100β荧光强度增加，平衡木以及疲劳转棒实验显示小鼠运动功能下降。与sham组相比，TBI3dpi组免疫荧光染色显示损伤部位Eftud2和S100β免疫荧光强度上升，同时RT-qPCR结果显示TNF-α、NLRP3、IL-1β转录水平升高，损伤部位呈炎性状态。<br>　　体外实验中，与对照组相比，LPS组WB结果显示Eftud2蛋白表达水平上升，RT-qPCR结果显示Eftud2转录水平上升，与体内结果趋势相同，同时免疫荧光染色显示星形胶质细胞体积增大，单细胞Eftud2荧光强度增加。与对照组相比，敲低组WB结果显示Eftud2蛋白表达水平下降，RT-qPCR结果显示Eftud2转录水平下降，达到了稳定的敲低效果。用siRNA敲低MA细胞中的Eftud2后用LPS刺激，与对照组相比，敲低组RT-qPCR结果显示促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、GM-CSF和CXCL-10转录水平下降，同时抗炎因子IL-10转录水平上升，减轻炎症反应。与对照组相比，过表达组WB结果显示Eftud2蛋白表达水平升高，RT-qPCR结果显示Eftud2转录水平上升，达到了过表达效果。用shRNA过表达MA细胞中的Eftud2后用LPS刺激，与对照组相比，过表达组RT-qPCR结果显示促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、GM-CSF和CXCL-10转录水平上升，同时抗炎因子IL-10转录水平下降，加重炎症反应。<br>　　机制方面，与对照组相比，敲低组WB结果显示MyD88、P-P65蛋白表达量下降，P65蛋白表达量无明显差异，RT-qPCR结果显示MyD88转录水平下降;与对照组相比,OE组WB结果显示MyD88、P-P65蛋白表达量上升，P65蛋白表达量无明显差异，RT-qPCR结果显示MyD88转录水平上升。<br>　　结论：Eftud2可能通过MyD88介导的信号通路调控星形胶质细胞的炎症反应。