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摘要背景和目的：<br>　　作为临床上常见的恶性肿瘤，肝细胞癌具有很高的侵袭性和死亡率，且其治疗在全球范围内都是一个巨大的挑战。目前，肝细胞癌的治疗主要包括早期的根治性肝切除术，以及中晚期的经导管动脉化疗栓塞术、放疗、对症治疗等。然而，早期肝切除术的复发率较高，以及中晚期的综合治疗并不能显著延长患者的生存时间，这二者是当前治疗的局限性。近年来，基于PD-1、LAG-3、CTLA-4等免疫靶点新开发的免疫治疗药物被认为是治疗中晚期肝细胞癌最有前景的药物，但这些药物延长肝细胞癌患者的生存时间并未达到预期。因此，为了开发出能够根治肝细胞癌的药物，就必须对得肝细胞癌的发病机制了解透彻。<br>　　MicroRNA（miRNA）是一种内源性小分子RNA的总称，其长度约20nt，并且无法编码蛋白质。从临床角度来看，许多研究显示miRNA可以作为肿瘤标志物来辅助各种肿瘤的早期诊断和评估肿瘤患者预后。从生物学的角度来看，miRNA通过与下游mRNA的3’UTR区域结合来阻止蛋白质的翻译过程或促进mRNA的降解，从而充当肿瘤抑制因子。作为最早发现的miRNA之一，let-7c-5p在许多肿瘤中都起着不可或缺的作用，例如肺癌、食管癌等。在肝细胞癌中，早先有研究表明let-7c-5p可以提高5-氟尿嘧啶的抗肿瘤作用。然而，由于miRNA的调控路径众多，let-7c-5p的作用靶点尚未完全揭示。<br>　　方法：<br>　　1.通过生物信息学分析探索let-7c-5p在肝细胞癌中的表达水平，以及与let-7c-5p表达水平相关的生存分析。此外，通过qPCR检测20对临床样本的let-7c-5p的表达水平。<br>　　2.使用let-7c-5pmimics过表达let-7c-5p后，通过CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞术来检测肝细胞癌细胞的增殖、迁移、侵袭以及凋亡。<br>　　3.通过生物学信息学分析预测let-7c-5p的下游靶基因，并且通过免疫组化、双荧光素酶分析以及WesternBlot分析进行验证。<br>　　4.通过挽救实验来明确let-7c-5p对肝细胞癌细胞的影响是由下游靶基因所介导。<br>　　5.通过生物信息学分析探索下游靶基因所调控的免疫通路以及免疫功能。<br>　　结果：<br>　　1.对公共数据库的数据进行可视化分析，其结果表明，较正常组织而言，let-7c-5p的表达水平在肝细胞癌组织中显著降低，且let-7c-5p的低表达意味着肝细胞癌患者预后不良。此外，qPCR检测结果证实，let-7c-5p在肝细胞癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织。<br>　　2.细胞表型实验结果表明，过表达let-7c-5p可抑制肝细胞癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力。此外，流式细胞术实验结果表明，过表达let-7c-5p可促进肝细胞癌细胞的凋亡。<br>　　3.公共数据库的分析结果显示，在肝细胞癌中，CDCA8的表达水平和let-7c-5p的表达水平呈强负相关，CDCA8在肝细胞癌组织中显著高表达，CDCA8的高表达意味着肝细胞癌患者预后不良，以及CDCA8的3’UTR端有let-7c-5p的潜在结合位点。此外，双荧光素酶分析和WesternBlot分析结果表明，CDCA8是let-7c-5p的下游靶基因并且受其负调节。<br>　　4.挽救实验结果表明，let-7c-5pinhibitor促进了肝细胞癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力，且抑制了肝癌细胞的凋亡率，而si-CDCA8逆转了let-7c-5pinhibitor对肝细胞癌细胞的作用。<br>　　5.公共数据库分析表明，CDCA8与一些免疫细胞、免疫调节剂相关，例如，PDCD-1和CTLA-4。此外，KEGG和GO分析结果表明，CDCA8可能参与了多种免疫通路和免疫功能的调节，如T细胞活化。<br>　　结论：<br>　　实验结果表明let-7c-5p可以通过下调免疫相关的CDCA8来抑制肝细胞癌，这有助于了解肝细胞癌的发病机制以及开发新型的治疗药物。