检索历史 清除

摘要目的：外泌体（exosome）作为细胞间通讯的媒介，在血液系统肿瘤的发生、进展中发挥重要作用。微小RNA（micro-RNA，miRNA）作为外泌体内容物，在外泌体发挥生物学功能的过程中起到重要作用。外泌体源性miR-181家族在不同疾病中的表达特点各有不同，目前关于外泌体源性miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病（Acutelymphoblasticleukemia，ALL）中的表达特点未有深入研究。本研究旨在探究外泌体源性miR-181b-5p在ALL儿童不同疾病阶段的表达水平差异及其与临床特点之间的关系。<br>　　方法：通过对临床资料的归纳整理，将入组儿童分为初诊组、复发组、缓解组、康复对照组。收集86例入组ALL患儿骨髓血浆标本，采用外泌体提取试剂盒提取骨髓血浆中外泌体，提取的外泌体通过以下三种途径进行鉴定：透射电子显微镜观察其形态、纳米颗粒跟踪（Nanoparticletrackinganalysis，NTA）法测定粒子内径、蛋白印迹试验（Western-blot，WB）鉴定外泌体标记蛋白；采用TRIzol法提取外泌体中RNA，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timefluorescencequantitativePCR，RT-qPCR）法对各患儿血浆外泌体中miR-181b-5p表达水平进行检测；采用GraphPadPrism8软件进行统计学分析，计数资料采用百分数进行表示并采用卡方检验及Fisher确切概率处理数据；计量资料采用中位数（范围）表示，采用秩和检验分析；以p小于0.05差异具有统计学意义。<br>　　结果：86例入组患儿中ALL初诊患儿42例，复发患儿12例，缓解期定期随访患儿14例，康复对照组18例。采用外泌体提取试剂盒成功提取出骨髓血浆中外泌体，在透射电子显微镜下观察外泌体颗粒具有双层膜结构，呈茶托样；WB显示外泌体标记蛋白TSG101和CD81在不同组别患儿血浆外泌体中稳定表达；NTA显示外泌体的尺寸分布直径在30-150nm。通过统计学分析发现ALL患儿初诊组、复发组中外泌体miR-181b-5p表达水平明显低于缓解组和对照组（p＜0.05）；初诊组中T-ALL患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平高于B-ALL患儿（p＜0.05）；初诊组患儿中男性患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平高于女性患儿（p＜0.01）。<br>　　结论：外泌体源性miR-181b-5p在ALL儿童不同疾病阶段表达水平呈动态变化，可以作为监测疾病状态的标记性miRNA；外泌体可以在肿瘤微环境中传递信息，作为生物分子靶向治疗的潜在载体。