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摘要研究背景与目的：<br>　　免疫治疗作为一种新兴的抗肿瘤策略，是最有前途的抗癌疗法之一；然而，许多患者具有免疫抑制剂的原发性耐药，大多数肿瘤患者单药的应答率15%–25%；大量的证据表明，放疗不但可以直接杀死肿瘤细胞，还可以提高抗肿瘤免疫能力。脉冲式低剂量率放疗（Pulsedlowdoserateirradiation，PLDR）是一种新的放疗分割方式，在有效控制肿瘤的同时减少正常组织的损伤。因此，本研究探讨PLDR联合抗PD-1单抗对肺癌抑制效果及肿瘤微环境的影响。<br>　　材料与方法：<br>　　1、将LLC细胞铺于6孔板中，分别用RT、PLDR方式照射细胞，照射剂量为0Gy、6Gy（每次2Gy，每天一次，连续3天）、10Gy（每次2Gy，每天一次，连续5天），将照射细胞继续培养24h后收获至流式管，采用流式细胞术检测LLC细胞表面PD-L1的表达水平；<br>　　2、在小鼠右侧大腿皮下注射LLC细胞，建立皮下移植瘤模型，待肿瘤生长至约100±30mm3时，将小鼠分为5组：空白对照组、常规放疗（RT）+IgG（同型对照）组、PLDR+IgG（同型对照）组、RT+aPD-1antibody(mAb)组、PLDR+aPD-1antibody(mAb)组。放疗剂量为10Gy（每次2Gy，每天一次，连续5天），分别采用常规放疗及PLDR（将2Gy分10次给予，每次0.2Gy，间隔3min）照射小鼠肿瘤；抗PD-1单抗或IgG同型抗体于放疗第一天开始，剂量为5mg/kg，腹腔给药（i.p.），每三天一次，共三次；观察并记录小鼠肿瘤体积变化；于治疗结束后第7天获取小鼠外周血、肿瘤及肿瘤引流淋巴结(TDLNs)，采用流式细胞术分析肿瘤组织微环境的改变联合治疗后激活的全身免疫反应；于治疗结束后第11天处死小鼠，取肿瘤组织通过Hamp;E染色观察各治疗组小鼠肿瘤的组织学变化；部分小鼠观察至自然死亡，分析生存时间。<br>　　结果：<br>　　1、在体外，通过PLDR照射可以上调LLC肿瘤细胞表面PD-L1的表达；<br>　　2、与其他治疗组相比，PLDR联合抗PD-1单抗能明显地抑制小鼠肺癌的生长，且在小鼠生存时间方面有明显的优势，其中对照组小鼠的中位生存时间为33天，RT组为41天，PLDR组为40天，RT+aPD-1mAb组为54天，PLDR+aPD-1mAb组的小鼠中位生存期最长，为63天，PLDR联合组显著延长了小鼠的生存期；<br>　　3、PLDR可以上调肿瘤组织表面PD-L1及淋巴细胞中PD-1的表达；PLDR联合抗PD-1单抗能降低上调的PD-L1、PD-1，阻断PD-1/PD-L1通路，恢复CTL的活性；<br>　　4、PLDR联合组显著提高了外周血及肿瘤组织中CD8+T细胞的含量，同时明显增加了引流淋巴结中CD80+DCs的比例、下调肿瘤组织中MDSCs的浸润程度。<br>　　结论：<br>　　本研究表明，PLDR上调了LLC细胞表面PD-L1和淋巴细胞表面PD-1的表达；PLDR联合抗PD-1单抗可以增加CD8+T细胞向肿瘤组织的浸润、有效刺激淋巴结中DCs的成熟活化，减少MDSCs的积累，从而改变肿瘤微环境，达到协同抑制小鼠肺癌生长的作用，改善生存期。