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摘要类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)为一种无明确病因的对称性、慢性、自身免疫性炎症疾病，主要侵害人体四肢关节，导致关节处明显可见的红肿、僵直，甚至关节严重畸形，功能完全丧失，给患者带来了巨大的痛苦和精神折磨。一线治疗药物如非甾体抗炎药和皮质类固醇能够快速见效、短期效果好，但长期使用会带来不可承受的毒副作用。寻找更有效安全的药物显得格外重要。<br>　　许多传统中药材因具有多靶点、毒副作用小、药用历史悠久等特点而被用于治疗类风湿性关节炎关节炎疾病，为治疗RA积累了巨大的药用样本和药用经验。羊踯躅(Rhododendron molle G.Don),一种广泛分布于中国南方地区的落叶灌木木本植物，其果实、根、花均可入药，具有麻醉镇痛、祛风除湿、散瘀杀虫等功效，在中医上具有治疗RA的悠久历史。现代药理学表明，它的果实、根、花都已具有良好的抗炎、抗RA活性。但对羊踯躅叶抗RA的研究十分有限，严重限制了羊踯躅的开发利用。本研究接着课题组的前期工作，围绕羊踯躅叶替代传统药用部位治疗RA的潜力以及羊踯躅抗RA活性成分的筛选和鉴定展开实验。具体结果如下：<br>　　通过细胞毒性实验探究羊踯躅不同药用部位的毒性作用，并确定后续实验的浓度范围。结果显示，高浓度(≥150μg/mL)时，羊踯躅叶的毒性作用比花和果实的高。但浓度为100μg/mL时，其对RAW264.7细胞的毒性与花和果实的相比，差异不明显。在GC-MS分析中，在羊踯躅叶中共检测到了834种化合物。其中萜类化合物最多，有224种，酮类化合物有72种。羊踯躅各药用部位化合物的种类和数量差别不大，但化合物含量占比不同。高效液相色谱显示，羊踯躅叶、花和果实的洗脱组分大致相同，说明它们的成分差异不大。从毒性和组分差异的角度来看，羊踯躅叶具有替代花和果实作为筛选抗RA活性成分的潜力。<br>　　前期的细胞实验和动物实验验证了羊踯躅叶的甲醇总提取物对细胞炎症模型具有很强的抗炎活性，而且能显著抑制佐剂性关节炎大鼠的爪关节肿胀、降低关节炎指数。细胞毒性实验显示，目标组分对细胞没有明显的毒性作用。使用脂多糖刺激RWA264.7细胞构建炎症模型。实时荧光定量结果显示，当目标组分浓度为100μg/mL时，炎症相关基因(TNF-α、IL-6、IL-1β和COX-2)表达水平分别降低了63.82%，80.44%,71.22%,80.46%，NO的生成量则降低了78.93%，表现出了良好的抗炎活性。通过UHPLC-Q-TOF-MS分析，初步鉴定了目标化合物中含有11种黄酮类化合物和18种萜类化合物。接着，对目标组分进行分离纯化，从中分离出了4个单体化合物。通过核磁质谱分析鉴定出了2个化合物的结构，分别是槲皮苷和槲皮素3’-O-葡萄糖，都属于黄酮类化合物，与UHPLC-Q-TOF-MS分析结果相一致。分子对接实验显示，槲皮苷与人源炎症蛋白(TNF-α、IL-6、IL-1β、COX-2和NF-κB)具有较强的相互作用，特别是与IL-1β，这可能是其抗炎活性的重要基础。<br>　　本研究结果表明羊踯躅叶具有替代花和果实作为治疗RA药用部位的潜力，羊踯躅叶中的黄酮类化合物是潜在的抗RA活性成分，为后续羊踯躅叶的临床应用和药物开发提供了实验支持。