摘要目的:<br> 通过对茵陈芩连汤(茵陈20g、黄芩10g、连翘15g、郁金15g、柴胡10g、丹参15g、茯苓20g、麸炒白术10g、麸炒苍术10g、太子参20g、炙甘草6g)联合恩替卡韦分散片(正大天晴药业股份有限公司,0.5mg/片)治疗肝胆湿热型慢乙肝肝纤维化临床疗效的观察,评价茵陈芩连汤联合恩替卡韦分散片治疗慢乙肝肝纤维化的有效性,并通过网络药理学,探索茵陈芩连汤治疗肝纤维化的潜在机制。<br> 材料与方法:<br> 研究一:本研究采用回顾性研究的方法,通过辽宁中医药大学附属医院肝病门诊电子病历系统,采集2018年6月至2022年6月期间就诊且在医院治疗及符合纳入标准的肝胆湿热型慢乙肝肝纤维化患者病例信息,筛选出63例患者作为观察组,接受茵陈芩连汤联合恩替卡韦分散片治疗,仅接受恩替卡韦分散片治疗的59例患者作为对照组。疗程至少6个月,比较两组的肝功能、病毒学应答、肝脏弹性硬度值(Liverstiffnessmeasurement,LSM)、APRI值及中医证候评分等指标的变化情况,评估两组疗效。<br> 研究二:通过中药药理系统数据库和分析平台(TraditionalChineseMedicineSystemsPharmacologyDatabaseandAnalysisPlatform,TCMSP)筛选出茵陈芩连汤中君药及臣药的有效活性成分及作用靶点;通过GeneCards、Disgenet等数据库筛选出肝纤维化(hepaticfibrosis,HF)的疾病靶点,将药物的作用靶点与疾病作用靶点取交集;运用Cytoscape3.7.1作图软件制作“药物-成分-作用靶点”互作网络图;基于STRING数据库构建蛋白相互作用网络(Protein-proteininteraction,PPI)筛选得到核心靶点;使用Cytoscape3.7.1构建药物-成分-核心靶点的网络图;最后利用Metascape数据库进行基因本体(GeneOntology,GO)分析与京都基因与基因组百科全书(KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes,KEGG)通路富集分析。<br> 结果:<br> 研究一:两组均可改善丙氨酸氨基转移酶(Alanineaminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartateaminotransferase,AST)水平及提高治疗后6个月乙型病毒性肝炎病毒载量(HepatitisBVirus-DNA,HBVDNA)阴转率(P<0.001),且两组比较无统计学差异(P>0.05);两组均可降低LSM、APRI值,改善中医证候评分,提高治疗后3个月HBVDNA阴转率(P<0.001),且观察组治疗效果更优(P<0.05);茵陈芩连汤总有效率为93.7%,其中治愈1例,显效5例,有效53例,无效4例。研究二:通过TCMSP数据库,获得连翘有效成分22个、黄芩有效成分36个、茵陈有效成分13个,通过SwissTargetPrediction数据库中获得复方作用靶点827个。从GeneCards、Disgenet等数据库共筛选出与HF相关的疾病靶点6516个,绘制韦恩图,得到594个茵陈芩连汤治疗HF的可能作用靶点;GO分析生物学过程(BiologicalProcess,BP)主要涉及细胞对蛋白质磷酸化、对激素的反应等;细胞学组分(CellularComponents,CC)主要涉及膜筏、膜微区、受体复合体等;分子生物学功能(MolecularFunction,MF)主要涉及蛋白质丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、蛋白激酶活性等;KEGG通路富集分析显示,PI3K-Akt信号通路与茵陈芩连汤治疗HF药理学机制相关程度最高。<br> 结论:<br> 1.联合用药在降低LSM、APRI值,改善HBVDNA阴转率方面优于单独使用恩替卡韦分散片。<br> 2.联合用药在改善中医证候评分及提高中医证候疗效方面更具优势。<br> 3.茵陈芩连汤通过多靶点、多成分、多通路干预HF。<br> 4.对其具体作用机制及靶点做出了预测,其主要通过调控PI3K-Akt、MAPK和AGE-RAGE等多条信号通路,参与炎症反应、抑制凋亡过程与促进细胞增殖等生物过程发挥抗纤作用,为今后开展实验研究提供了方向。
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