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岩藻多糖的乙酰水杨酸改性及其抗肿瘤活性研究

摘要岩藻多糖(Fucoidans)是一种主要提取自褐藻的海洋硫酸多糖,不仅原料来源广、毒性低,还具有抗肿瘤、抗病毒、免疫调节等生理功能,引起了生物、医药领域研究者的广泛关注。然而,天然岩藻多糖由于分子量大、黏度高、不易吸收,生物活性的发挥受到了限制。结构改性是改善多糖活性、提高多糖利用度的有效方法之一。但目前关于岩藻多糖结构改性及其产物活性的研究报道较少。因此,本文以岩藻多糖为研究对象,以乙酰水杨酸(ASA)作为接枝物,合成了岩藻多糖的乙酰水杨酸衍生物(ASA-CDI-DF),继而分析了其物理和化学特性,并初步探究了改性后岩藻多糖的抗肿瘤活性及其作用机制。取得的研究结果如下:<br>  1.以H2O2-VC联合氧化法降解岩藻多糖(FPS),制备低分子量多糖(DFSP),通过单因素试验法得到最佳的氧化降解条件为降解剂(H2O2和VC)浓度各为25mM、料液比1:100(g/mL)、降解温度50℃、降解时间2h,该条件下制备的DFSP得率为78.5%。<br>  2.基于最佳氧化降解条件得到的DFSP分子量显著降低,为64.66kDa,但其化学组成与FPS相比无显著差异,含有21.40%硫酸基和7.85%糖醛酸,其总糖含量为71.17%,主要由岩藻糖和半乳糖组成。FT-IR、XRD和Zeta-电位及粒径分布结果均表明H2O2-VC联合氧化法对岩藻多糖的基本结构未造成破坏,保留了活性基团-SO42-,并减小了DFSP的粒径,使其在溶液中的分散性增强。<br>  3.进一步以DFPS为原料,采用CDI原位活化乙酰水杨酸(ASA)酯化法合成岩藻多糖的乙酰水杨酸衍生物ASA-CDI-DF。发现DFPS添加量对乙酰水杨酸的接枝率有显著影响,随着DFPS添加量的增加,ASA-CDI-DF中乙酰水杨酸的接枝率呈现先增加后降低的变化,当DFPS添加量为1.2g时,乙酰水杨酸的接枝率最高,达到15.52%。化学组成检测结果表明乙酰水杨酸改性后ASA-CDI-DF中硫酸基团含量降低,总糖和糖醛酸含量无明显变化。分子量测定结果显示,改性后岩藻多糖的分散程度明显降低,分子量分布更均一,同时多糖均一性增强,有利于ASA-CDI-DF的纯化精制以及生物活性的发挥。<br>  4.初步探究了ASA-CDI-DF的抗肿瘤活性及其作用机制。与FPS相比,ASA-CDI-DF处理后的A549细胞增殖活性受到显著抑制,呈现出明显的细胞核破碎、染色质凝结、线粒体膜电位(△ψ)下降和凋亡率上升等细胞凋亡现象。进一步研究发现,ASA-CDI-DF通过抑制NF-κB通路中p-NF-κBp65蛋白的表达,继而增加促凋亡蛋白Bax、降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量,从而激活线粒体凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡。

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导师 李玉芹
发布时间 2023-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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