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摘要MicroRNA（miRNA）是癌症、神经退行性疾病和糖尿病等多种疾病的生物标志物。胆碱是一种重要食品添加剂，也是多种疾病的早期生物标志物。因此，建立高效、准确、便携的miRNA和胆碱检测方法在疾病诊断治疗和食品工业中具有重要的意义。本论文以氧化型3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（oxTMB）为探针，建立了基于比色和光热双传感的miRNA和胆碱即时检测方法。具体内容如下：<br>　　第一，以oxTMB为探针的比色和光热双传感模式检测let-7a。以磁性微球为载体，利用两种无酶扩增技术——催化发夹组装（CHA）和杂交链式反应（HCR）对let-7a的检测信号进行了级联放大，同时在HCR过程中引入了标记有辣根过氧化物酶（HRP）的发夹核酸使let-7a含量与磁性微球表面HRP的富集量密切关联，通过HRP催化TMB-H2O2体系产生oxTMB，经过对体系中生成的oxTMB的比色和光热双传感模式检测间接实现对let-7a的定量分析。结果表明，比色传感模式和光热传感模式，let-7a的线性检测范围均为0.010nM-1.0nM，检出限分别为2.8pM和3.4pM。考察了其他几种癌症相关的miRNA序列对let-7a检测的影响，结果表明本方法有良好的抗干扰能力。对HeLa细胞总miRNA中let-7a含量以及加标回收率进行了测量，均取得了较为满意的结果，表明本方法可以用于复杂样品体系中let-7a含量的检测。<br>　　第二，以oxTMB为探针的比色和光热双传感模式检测胆碱。首先利用胆碱氧化酶（ChOx）催化胆碱生成H2O2，然后加入HRP和TMB，HRP催化H2O2氧化TMB生成oxTMB，oxTMB的生成量与胆碱生成的H2O2含量相关，因此通过对oxTMB的比色和光热测量即可实现胆碱的即时检测。结果表明，比色传感模式和光热传感模式，胆碱的线性范围均为10.0μM-300μM，检出限分别为2.54μM和3.32μM。考察了其他几种氨基酸和金属阳离子对本实验的干扰，结果表明本方法有良好的特异性。利用本方法对婴幼儿奶粉中胆碱含量进行了测定，并与商品包装标示值进行了对比，均取得了较为满意的结果，说明本方法在复杂样品体系中胆碱的测量方面具有一定的应用前景。<br>　　本文所建立比色和光热双传感检测方法主要具有以下特点：第一、光热传感检测仅需要家庭常备的温度计即可实现对目标分子的准确定量，对miRNA和胆碱在实验室外的即时检测提供了新的思路；第二、比色和光热双传感模式的检测结果可以互相验证，提高了目标分子检测的准确性。这些特点使本方法在miRNA和胆碱检测方面具有良好的应用前景，同时本方法也为其他物质的即时检测提供新的思路。