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摘要【目的】<br>　　大肠癌（CRC）的发生和发展是一个多步骤的过程，涉及多个癌基因和抑癌基因的失调，其发病机制尚未完全明了。自噬是高度保守的分解代谢过程，它通过降解和循环细胞内错误折叠或聚集的蛋白质、受损细胞器以及清除病原体，有助于维持细胞内环境稳态。自噬异常与肿瘤发生发展密切相关。长链非编码RNA（lncRNA）是一类不具有编码蛋白功能的RNA，通过调控靶基因的表达参与疾病的发生发展。研究报道，lncRNADRAIC在多种肿瘤中异常表达，影响细胞自噬参与肿瘤进展。然而其在CRC的表达及作用尚未完全明确。本研究通过组织检测和体外细胞实验探讨DRAIC在CRC组织中的表达，以及对CRC细胞凋亡和自噬的影响和可能的机制，将进一步丰富肿瘤发生的分子机制研究，有助于寻找CRC诊断、治疗的新靶标。<br>　　【方法】<br>　　1.收集CRC组织22例和正常大肠黏膜组织（Normal）22例，用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测lncRNADRAIC的表达。收集CRC患者的临床和病理资料，分析DRAIC表达与临床病理指标的相关性。<br>　　2.构建DRAIC过表达质粒（pcDNA3.1-DRAIC），将pcDNA3.1-DRAIC转染入HCT-116和HT-29细胞（CRC细胞株）以上调DRAIC的表达，qRT-PCR检测DRAIC过表达效果；用CCK-8法、AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术分别检测CRC细胞的增殖和凋亡情况，蛋白质免疫印迹法（Westernblot）检测凋亡相关蛋白CleavedCaspase-3、CleavedPARP的表达。<br>　　3.将pcDNA3.1-DRAIC转染入HCT-116和HT-29细胞，Westernblot检测自噬相关蛋白LC3B及AKT/mTOR通路蛋白AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的表达。<br>　　4.将pcDNA3.1-DRAIC转染入HCT-116和HT-29细胞，并加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）后，采用CCK-8法、AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术分别检测CRC细胞的增殖、凋亡情况，Westernblot检测HCT-116细胞中LC3B、CleavedCaspase-3和CleavedPARP蛋白的表达。<br>　　【结果】<br>　　1.lncRNADRAIC在CRC组织的表达及与CRC患者临床病理指标的相关性<br>　　（1）与Normal组相比，CRC组DRAIC表达下调，差异有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　（2）分析DRAIC与CRC患者各项临床病理指标之间的关系，结果显示，DRAIC的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度、是否有淋巴结转移和远处转移、CRC临床分期等无明显相关性（P＞0.05）。<br>　　2.lncRNADRAIC对CRC细胞增殖和凋亡的影响<br>　　与空载体对照（pcDNA3.1）转染组相比，pcDNA3.1-DRAIC转染组HCT-116和HT-29细胞的DRAIC表达明显上调（P＜0.05）；细胞增殖能力减弱，凋亡率增加，CleavedCaspase-3和CleavedPARP蛋白表达上调，差异均有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　3.lncRNADRAIC对CRC细胞自噬和AKT/mTOR信号通路的影响<br>　　与pcDNA3.1转染组相比，pcDNA3.1-DRAIC转染组HCT-116和HT-29细胞的LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量上调，p-AKT和p-mTOR蛋白相对表达量下调，差异均有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　4.lncRNADRAIC通过调控自噬影响CRC细胞增殖和凋亡<br>　　与pcDNA3.1转染组相比，pcDNA3.1-DRAIC转染组HCT-116和HT-29细胞的增殖能力减弱，凋亡率增加，LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量、CleavedCaspase-3和CleavedPARP蛋白表达上调，差异均有统计学意义（P＜0.05）；加入3-MA后，与pcDNA3.1-DRAIC转染组相比，pcDNA3.1-DRAIC+3-MA组HCT-116和HT-29细胞的增殖能力增强，凋亡率下降，HCT-116细胞的LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量、CleavedCaspase-3和CleavedPARP蛋白表达下调，差异均有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　【结论】<br>　　1.DRAIC在CRC组织中表达显著下调；DRAIC的表达与CRC患者临床病理指标无明显相关性。<br>　　2.DRAIC可抑制CRC细胞增殖，促进CRC细胞凋亡和自噬，抑制AKT/mTOR信号通路。<br>　　3.DRAIC通过增强CRC细胞自噬，从而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。