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摘要研究背景<br>　　腹主动脉瘤（Abdominalaorticaneurysm，AAA）是一种常见的血管疾病，其主要特征是主动脉壁的进行性扩张和重塑。由于AAA的病变过程较为隐匿，因此该病的早期诊断和治疗一直是一个难点。AAA患者最常见的死亡原因是动脉瘤破裂，因此寻找腹主动脉瘤破裂的高风险因子具有重要意义。<br>　　表观遗传学修饰是一个新兴的生物学研究领域，研究表明RNAm6A甲基化修饰在RNA功能的调节中扮演着重要的角色，并参与了包括疾病进展在内的各种生物过程。在AAA的发病过程中，m6A甲基化调控因子可能也扮演着重要的作用。因此，本研究旨在阐明RNAm6A甲基化调控因子在AAA中的作用，探究其与AAA病变进展的关系，以期为AAA的风险评估和治疗提供新的靶点和策略。<br>　　研究目的<br>　　探究RNAm6A甲基化修饰在AAA中的具体作用机制，并研究与AAA发生和进展有关的关键基因的m6A甲基化修饰情况。特别地，我们将聚焦于RMB15调控CASP3表达促进平滑肌细胞凋亡的潜在分子机制研究，以期深入了解这些分子机制与AAA的发生和进展之间的关系。此外，我们还将分析RNAm6A甲基化调控因子与免疫细胞浸润之间的关系，探究这些因子在调节免疫细胞浸润过程中的作用，为寻找新的AAA治疗靶点提供新思路。<br>　　研究方法<br>　　1、本研究从GEO数据库下载GSE98278数据集，对稳定型腹主动脉瘤（Electivestableabdominalaorticaneurysms，eAAA）和腹主动脉瘤破裂（Rupturedabdominalaorticaneurysm，rAAA）进行m6A甲基化调控因子进行差异分析。<br>　　2、采用随机森林模型（RF）来筛选候选m6A调节因子，以预测rAAA的风险。<br>　　3、采用单样本基因集富集分析（ssGSEA）方法明确了AAA中免疫细胞的浸润程度，揭示了免疫细胞在AAA发展中的潜在作用。<br>　　4、RNAm6A甲基化定量试剂盒检测AAA和正常腹主动脉的总RNA的m6A甲基化水平，为后续研究提供基础数据支持。<br>　　5、TUNEL凋亡检测试剂盒检测干扰RBM15后主动脉平滑肌细胞的凋亡情况，进一步探究RBM15在AAA发展中的作用。<br>　　6、通过Westernblot、RNA免疫沉淀（RIP）和甲基化RNA免疫沉淀-定量聚合酶链反应（MeRIP-RT-PCR）等实验手段，证实RBM15以m6A依赖的方式调控CASP3的表达，揭示了RBM15调控CASP3表达促进平滑肌细胞凋亡的潜在分子机制。<br>　　研究结果<br>　　1、根据GSE98278数据集分析发现，在rAAA中，RBM15、WTAP、ALKBH5和IGFBP3的表达水平均高于eAAA，这表明这些基因可能与rAAA的发生有关。<br>　　2、m6A水平在rAAA中也比eAAA和正常腹主动脉高，这进一步支持了m6A甲基化修饰在rAAA中的重要作用。<br>　　3、通过随机森林模型筛选出5个候选m6A甲基化调控因子，并且在AAA样本验证了它们的表达，这些因子有望成为预测rAAA风险的潜在生物标志物。<br>　　4、下调RBM15可以抑制HASMCs的凋亡，这表明RBM15可能参与rAAA发生的机制之一是通过调节HASMCs的凋亡。<br>　　5、RBM15介导m6A甲基化修饰调控CASP3表达，这提供了RBM15作为调节HASMCs凋亡的新靶点的证据。<br>　　6、研究结果表明，5个m6A甲基化调节因子与免疫细胞浸润之间有很强的相关性，这进一步表明m6A甲基化修饰可能与AAA的免疫反应相关。<br>　　结论<br>　　在本研究中，我们发现AAA组织中m6A水平明显高于正常主动脉组织，这进一步增加了AAA破裂的风险。通过使用RF对这些基因的重要性进行排序，鉴定出了5个m6A甲基化调控因子，其中RBM15是最为关键的因子。降低RBM15的表达能够通过m6A依赖的方式降低CASP3的表达，并抑制平滑肌细胞的凋亡。因此，RBM15可能是抑制AAA破裂的潜在治疗靶点。