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摘要黄芪是一种常用的传统中药，有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血的功效，用于气虚乏力、食少便溏、中气下陷、久溃不敛。目前，蒙古黄芪是商品黄芪药材的主流品种。其中产于北岳恒山山脉毗邻地区的蒙古黄芪俗称恒山黄芪，生长年限多在 5 年以上，是药用黄芪中的优质品种。随着黄芪用量和需求的增加，生长期为 2 年的育苗移栽蒙古黄芪成为药用黄芪的主流商品。由于种植模式不同，它们不仅在外观上不同，而且在化学成分上也不同。根据《中国药典》，毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷为黄芪的质量评价指标。此外，还有多种研究采用高效液相色谱法（HPLC）或液相色谱-质谱法（LC-MS）同时测定黄芪中多种化学成分。然而，基于有限的指标成分的质量评价并不能全面比较不同栽培方法对黄芪的化学差异，恒山黄芪的化学特征仍需要深入研究。<br>　　目的：<br>　　本研究拟建立基于超高效液相色谱-三重四极杆质谱（UHPLC-Q-TRAP-MS）的拟靶向代谢组学方法并结合化学计量学方法分析恒山黄芪和移栽黄芪间的化学差异。<br>　　方法：<br>　　1.拟靶向代谢组学方法的建立：首先通过超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UHPLC-Q-TOF-MS）在不同的碰撞能量（CE）下采集黄芪的高分辨率质谱数据，以确定黄芪中黄酮类、三萜皂苷和其他成分的离子对信息。然后通过超高效液相色谱串联三重四级杆质谱（UHPLC-Q-TRAP-MS）选择最佳离子对，优化最佳CE和去簇电压（DP），并对所建立的拟靶向代谢组学分析方法的线性关系、重复性、日内和日间精密度、稳定性进行方法学考察。<br>　　2.基于拟靶向代谢组学的恒山黄芪化学特征研究：收集山西产地的恒山黄芪（仿野生黄芪）29批，山西浑源、广灵、应县等地及甘肃、内蒙古的移栽黄芪12批作为参照样本，采用所建立的拟靶向代谢组学方法进样分析，并运用多元统计、系统聚类、lasso 回归、随机森林等多种化学计量学方法对两组黄芪样本之间的化学差异进行分析。<br>　　结果：<br>　　1.拟靶向代谢组学方法的建立：所建立的基于UHPLC-sMRM的拟靶向代谢组学分析方法方法学考察结果显示，正负离子模式下共有 114 个化合物表现出良好的线性关系，且该方法具有较好的精密度和重复性。通过11个黄芪标准品进一步的验证结果也显示所建立的方法可靠。<br>　　2.基于拟靶向代谢组学的恒山黄芪化学特征研究：采用已建立的拟靶向代谢组学分析方法，对41批黄芪中 114个化合物进行相对定量。通过多变量和单变量分析，确定了恒山黄芪和移栽黄芪之间的26个差异代谢物。通过lasso回归进一步筛选出5个标志化合物，并通过系统聚类、随机森林、支持向量机和逻辑回归分析验证了其鉴别能力。此外，丙二酰取代的黄酮类化合物在恒山黄芪中的含量相对高于移栽黄芪，因此推断丙二酰取代是恒山黄芪中黄酮类化合物的特征。<br>　　结论：<br>　　本研究开发了一种基于 UHPLC-sMRM 的拟靶向代谢组学方法，可同时对黄芪中114种化合物进行相对定量，包括50个异黄酮、10个黄酮、11个异黄烷、10个紫檀烷、10个三萜皂苷和23个其他化合物。采用所建立的方法，确定了恒山黄芪和移栽黄芪之间的化学差异，并建立了判别模型，为恒山黄芪的化学特征研究及质量评价提供了依据。