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摘要Oddi括约肌（sphincter of Oddi，SO）功能障碍（sphincter of Oddi dysfuncti on，SOD）是一种由于SO功能障碍，导致胆汁或胰液无法正常流动引起的功能性疾病，主要表现为腹痛、腹胀、恶心、黄疸等。研究发现，SOD不仅是大多数胆道和胰腺炎性和功能性疾病发病机理中的重要环节，也是这些疾病的关键继发性病理改变，但其具体发病机制尚不明确，因此，迫切需要探寻SOD的具体发病机制，寻找更为有效可靠的治疗方法。有研究表明，Cajal间质细胞作为神经与平滑肌细胞信息整合的中继站，影响SO协调运动，其过度凋亡在SOD的发生发展的过程中起着重要作用。临床针灸用于缓解疼痛治疗已有数千年历史，电针作为针灸治疗的一种方法简便易施，对SO运动功能有良好的调节作用。但是电针对SOD影响及机制的基础实验研究未见报道，研究证实：高胆固醇血症兔为SOD的重要模型。<br>　　目的：<br>　　探讨电针治疗对高胆固醇血症兔SO动力及SO内Cajal间质细胞凋亡的影响，初步揭示电针治疗对高胆固醇血症兔SOD的治疗效果及作用机制，为针灸治疗临床S OD提供理论依据。<br>　　方法：<br>　　选择24只健康家兔，将它们随机分成三组：正常对照组（Control,6只），高胆固醇模型组（Model，6只）和电针治疗组（足三里组ST36, 6只以及足三里和其配穴期门、阳陵泉组ST36+，6只）。其中正常对照组进行普通标准饲料喂养，而高胆固醇模型组以及治疗组则进行高胆固醇饲料喂养。造模8周后，每只兔经耳缘静脉采血200uL，测血清总胆固醇，血清总胆固醇超过10mmol/L，则表明该模型已经构建成功。然后进行电针治疗，ST36治疗组采用电针刺激兔双侧足三里穴，ST 36+治疗组采用电针刺激兔双侧足三里的同时配以双侧期门穴和阳陵泉穴。34天（即经过三个疗程）治疗后，麻醉兔，体内测量SO压力以检测SO功能，后处死兔，取SO组织以及血清，通过显微镜观察SO组织形态，检测血清中IL-6、IL-1β、TNF-α和氧化应激因子sod的水平，并结合PCR技术分析各组兔SO组织内SCF、STAT3、JAK2的mRNA水平变化，通过免疫组化技术分析Oddi括约肌内c-kit蛋白、Bcl-2、Bax、Cleaved capase3凋亡相关蛋白的表达，采用Western Blot技术分析Oddi括约肌中c-kit蛋白、Bcl-2、Bax和Cleaved capase3凋亡相关蛋白的表达水平变化，通过TUNEL染色和免疫荧光染色双重定位检测Oddi括约肌内c-kit蛋白的凋亡状态。<br>　　结果：<br>　　1 模型评价：与正常对照组兔相比，高胆固醇模型组与电针治疗组兔血清总胆固醇水平（＞10mmol/L），显著升高（p ＜0.0001），表明高胆固醇血症兔模型成功建立。结合HE染色后高胆固醇模型组兔Oddi括约肌组织病理形态及压力检测结果，进一步验证高胆固醇血症兔模型成功建立。<br>　　2 HE染色：与正常对照组相比模型组Oddi括约肌组织形态均受到不同程度损伤，高胆固醇模型组兔SO内组织结构混乱，肌层内腺体排列不规则，间隙增宽，排列松散，炎性细胞浸润，电针治疗后，与高胆固醇组相比，电针治疗组兔病理形态有所改善，组织结构相对紧密。<br>　　3 SO压力测定：与正常对照组兔相比，高胆固醇模型组兔SO压力明显增加，收缩振幅减小；电针治疗后，与高胆固醇模型组兔相比，电针治疗组SO基础压力明显降低，收缩振幅增加。<br>　　4 兔血清中炎性因子与氧化应激因子的改变：与正常对照组兔相比，高胆固醇模型组兔血清中TNF-α、IL-6、IL-1β炎症因子含量均显著增加，sod含量明显减少；电针治疗后，与高胆固醇模型组兔相比，电针治疗组兔TNF-α、IL-6、IL-1β炎症因子含量显著减少，sod含量明显增加。<br>　　5 Cajal间质细胞的凋亡结果：TUNEL和c-kit免疫荧光双染法显示，与正常对照组兔相比，高胆固醇模型组兔c-kit标记的Cajal间质细胞凋亡增多，与高胆固醇模型组兔相比，电针治疗后Cajal间质细胞凋亡有所减少；免疫组化法以及WB检测SO组织内c-kit、Bcl-2、Bax、Cleaved capase3蛋白表达水平变化结果显示，与正常对照组兔相比，高胆固醇模型组兔c-kit蛋白以及Bcl-2蛋白表达水平降低，Bax、Cleaved capase3凋亡相关蛋白表达水平升高，与高胆固醇模型组兔相比，电针治疗组兔SO组织中c-kit、Bcl-2蛋白表达水平升高，Bax、Cleaved capase3蛋白表达水平降低。<br>　　6 SO组织内SCF、STAT3以及JAK2mRNA水平的检测：与正常对照组相比，高胆固醇模型组兔SO组织中SCF、STAT3和JAK2 mRNA的表达量明显下降；经过电针治疗后，与高胆固醇模型组兔相比，兔SO组织中SCF、STAT3以及JAK2 mRNA的表达明显上升。<br>　　结论：<br>　　1 高胆固醇血症兔SO压力明显升高，电针治疗高胆固醇血症兔后SO压力显著下降，电针治疗后高胆固醇血症兔SO动力功能改善，表明电针对高胆固醇血症兔S OD有良好的治疗作用。<br>　　2 电针治疗后高胆固醇血症兔SO内Cajal间质细胞凋亡减少。其机制可能是通过激活SCF/c-kit，STAT3/JAK2信号通路，上调高胆固醇血症兔SO组织内Bcl-2蛋白表达、抑制Bax和Cleaved capase3凋亡相关蛋白的表达，保护Cajal间质细胞，减少Cajal间质细胞凋亡，调节SO功能，改善高胆固醇血症兔SOD。