摘要目的:对鼻内翻性乳头状瘤组织进行共聚焦显微拉曼光谱检测,寻找拉曼光谱中具有特征性的分子指纹,研究拉曼光谱技术在诊断鼻内翻性乳头状瘤疾病的价值并评估其诊断效能。<br> 方法:收集2021年3月至2022年12月在大连医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科进行鼻腔鼻窦手术的鼻内翻性乳头状瘤组织样本17例(各取3个随机测量点,共获取51条光谱),正常鼻黏膜组织样本14例(各取3个随机测量点,共获取42条光谱),选择光谱区域为600-1800cm-1,该区域被称为生物指纹区,应用激发光波长为532nm的共聚焦显微拉曼光谱仪进行测量。为获得较为理想的、稳定的拉曼信号,将测得的光谱进行去除“宇宙射线”、扣基线矫正、最大强度归一化、平均光谱矫正等预处理,再应用正交偏最小二乘判别分析(OrthogonalPartialLeastSquaresDiscriminationAnalysis,OPLS-DA)模型对其进行数据分析,最后采用受试者工作特征曲线(Receiveroperatingcharacteristiccurve,ROC)验证模型效能。<br> 结果:1.鼻内翻性乳头状瘤组和正常鼻黏膜组的平均拉曼光谱峰分布基本一致,主要拉曼位移在749cm-1、1001cm-1、1153cm-1、1172cm-1、1224cm-1、1300cm-1、1339cm-1、1371cm-1、1445cm-1、1520cm-1、1539cm-1、1588cm-1、1638cm-1、1567cm-1,但不同峰位处存在强度上的差异;2.和正常组相比,鼻内翻性乳头状瘤组在1172cm-1、1224cm-1、1339cm-1、1371cm-1、1588cm-1、1638cm-1拉曼位移处显示较低的谱峰强度,而在749cm-1、1001cm-1、1153cm-1、1300cm-1、1445cm-1、1520cm-1、1539cm-1、1657cm-1拉曼位移处,则显示较高的谱峰强度。可知正常鼻黏膜组中具有相对鼻内翻性乳头状瘤组较高的酪氨酸、胶原蛋白、磷脂、乙酰乙酸盐和酰胺Ⅰ带,鼻内翻性乳头状瘤组中具有相对正常鼻黏膜组较高的色氨酸、苯丙氨酸、蛋白质、胡萝卜素、酰胺Ⅲ带、类胡萝卜素类、酰胺Ⅱ带和脂质,这些峰位强度的变化对应着不同生物分子和代谢产物成分的差异,这有利于通过拉曼光谱技术实现对鼻内翻性乳头状瘤的诊断;3.鼻内翻性乳头状瘤组织的拉曼光谱中出现的苯丙氨酸、胡萝卜素含量增加以及胶原蛋白含量降低,提示鼻内翻性乳头状瘤组织有潜在的癌变可能,说明鼻内翻性乳头状瘤组织细胞在增生过程中有发生癌变的倾向;4.对获取的两组光谱进行预处理后,通过OPLS-DA模型的分析得出其X矩阵的累计解释率R2X(cum)达到了0.733,Y矩阵的累计解释率R2Y(cum)达到了0.803,而模型的可预测性Q2(cum)则达到了0.68。基于OPLS-DA模型的ROC曲线分析结果得出AUC值达到了0.995,该模型在区分鼻内翻性乳头状瘤组织和正常鼻黏膜组织具有较高的准确性和可靠性。<br> 结论:1.采用共聚焦显微拉曼光谱技术可以提供鼻内翻性乳头状瘤组织的具有特征性差异的分子光谱指纹信息,可以准确区分正常鼻黏膜组织,对鼻内翻性乳头状瘤组织进行快速准确的诊断,有望发展成为一种临床新型诊断方法;2.鼻内翻性乳头状瘤的拉曼光谱中具有明显差异的分子,如苯丙氨酸、类胡萝卜素、胶原蛋白等,从分子构成及代谢方面提示内翻性乳头状瘤组织细胞在增生过程中有发生癌变的倾向,这提示在该疾病发生发展中这些分子起关键作用,其机制有必要进一步研究。
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