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积雪草酸对小鼠放射性心脏损伤保护作用的研究

摘要目的:<br>  通过观察传统中药积雪草酸(Asiatic acid,AA)对小鼠放射后心脏损伤(RIHD)程度的影响,研究该药对小鼠RIHD的保护作用,并初步探讨该药物的保护作用机制,旨在为RIHD的保护提供用药参考。<br>  方法:<br>  将雄性C57BL6小鼠按照随机数表方法,每组10只共分为3组:空白对照组(A组);单纯照射组(B组);照射+AA给药组(C组)。A组小鼠在整个实验过程中不进行任何干预;B组和C组小鼠均于实验第2周时使用X线照射心前区,B组和C组小鼠从第1天开始每天固定时间分别以生理盐水及相同体积的浓度为100mg/kg的AA灌胃。<br>  1.照射处理:实验第2周开始时,B组和C组小鼠心前区充分暴露于直线加速器下,在使用6MV-X线15Gy剂量照射;<br>  2.非对照组处理:照射前1周开始,C组小鼠将AA(100mg/kg)通过灌胃的方式每天同一时间给药 1 次,直至实验结束;B组小鼠则每天同一时间给予相同质量的生理盐水,直至实验结束;<br>  3.照射后第8周时使用小动物心脏彩超评价小鼠心脏收缩功能;<br>  4.形态学观察:照射后第8周时,心脏彩超检测结束后处死小鼠,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠心肌组织的形态学改变;Masson染色检测小鼠心肌纤维化程度;<br>  5.生物化学检测:WB等方法检测小鼠心脏组织HO-1,TGF-β1,Smad2/3蛋白表达水平。<br>  结果:<br>  1.小鼠一般情况:心前区照射后第8周时,小鼠出现活动不积极现象,摄食摄水活动减弱,并出现明显照射区脱毛、毛发变白等现象;<br>  2.心脏彩超显示:照射+AA给药组小鼠心脏收缩功能(EF、FS)较单纯照射组得到改善,但较空白对照组而言仍较低;<br>  3.HE染色及Masson染色结果显示:除A组外,其余各组小鼠心肌组织均出现不同程度的病理形态改变,以炎性反应以及血管周围纤维化为主;心肌出现水肿,心肌细胞排列紊乱,心肌间质内充满炎症细胞浸润,但其中C组心肌损伤较B组减轻,C组心肌纤维化程度也较B组有所减轻。<br>  4.WB结果显示:各组小鼠心肌组织HO-1、TGF-β1,Smad2/3蛋白阳性表达率比较有显著性差异(P<0.05):与空白对照组比较,单纯照射组小鼠心肌细胞HO-1、TGF-β1、Smad2/3水平表达明显升高;与单纯照射组比较,AA干预组小鼠心肌细胞HO-1、TGF-β1、Smad2/3表达水平降低,但较空白对照组而言仍较高。<br>  结论:<br>  1、使用6MV-X线15Gy单次照射C57BL6小鼠心前区8周,可成功建立 RIHD动物模型;<br>  2、小鼠的心脏受辐射后8周,心肌可出现炎症和纤维化症状,可能与心肌组织相关纤维化因子TGF-β1、Smad2/3表达增加有关。<br>  3、AA给药可降低HO-1蛋白表达,反映心肌组织氧化应激水平减轻,且AA可减轻小鼠因辐射诱导的心肌纤维化损伤,其心脏保护机制可能与降低心肌组织氧化应激水平有关,但其具体通路和机制尚未完全明晰,仍有待于进一步研究。

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