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西藏大花黄黄牡丹种子的物质基础及脂肪酸酸评价研究

摘要大花黄牡丹(Paeonia ludlowii)为芍药科、芍药属植物,仅见于西藏东南部林芝地区,当地藏民早在几百年前开始用其根皮治疗妇科、皮肤和心脑血管等方面疾病。大花黄牡丹种仁富含多种不饱和脂肪酸,种壳中富含花青素,有较高的产品开发价值。近年来大花黄牡丹研究报道较少,主要集中在遗传、生态和栽培等方面,化学成分特别是种子成分方面的报道寥寥无几。本研究在运用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)、高分辨质谱技术(UPLC-Q-TOF/MS),在分析大花黄牡丹种子化学成分的基础之上,采用一测多评法(QAMS)和指纹图谱构建大花黄牡丹种子的质量评价方法。该实验结果有助于后续大花黄牡丹籽油、种皮的新产品研发,为大花黄牡丹综合开发利用提供科学依据,同时也为不同品种牡丹种子的质量评价提供有益思路。本论文的研究内容包括以下三个部分:<br>  第一部分 大花黄牡丹种子物质基础研究<br>  本部分第一章为 GC-MS法分析大花黄牡丹种子中的脂溶性成分。采用Agilent DB-1701色谱柱,进样口温度、程序升温最高温度、离子源温度分别为260、250、350℃;应用工作站NIST数据库,在大花黄牡丹种皮中共鉴定出了21个化合物,在种仁中共鉴定出了26个化合物。采用选择离子监测模式(SIM)共鉴定出了12种脂肪酸,其中饱和脂肪酸有5种,不饱和脂肪酸有7种。该实验结果进一步明晰了大花黄牡丹种子中脂溶性成分的物质基础。<br>  本部分第二章为 UPLC-Q-TOF/MS 法分析大花黄牡丹种子中的醇水溶性成分,并采用多元统计学方法分析种皮与种仁的化学差异。定性分析共鉴定出了137个化合物,其中仅种皮中含有的成分21个,仅种仁中含有的成分26个,种皮及种仁中共有成分90个。在正负离子模式下共找到差异性离子25个,其中同位素离子5个,正负离子鉴定结果中均存在的化合物有 3 个(芹菜素、木犀草素、苏富赤霉素 C),未鉴定出的离子有3个,共鉴定出了14个差异性化合物,其中8个为牡丹相关文献中首次报道。该研究结果进一步阐明了大花黄牡丹种子中醇水溶性成分的物质基础,为种子的质量控制、产品研发等提供科学参考。<br>  第二部分 GC法建立大花黄牡丹种子脂肪酸一测多评的研究<br>  采用气相色谱法(GC)建立起大花黄牡丹种子中特征成分(棕榈酸、油酸、亚油酸、亚麻酸)的一测多评定量分析方法。对色谱条件、提取方法和方法学进行了考察;通过不同浓度标准品的检测结果计算出了3种成分的相对校正因子,并比较了10个批次样品的含量。由分析结果可知,外标法与一测多评法所计算的含量结果无显著性差异,可以用一测多评法对不同产地大花黄牡丹种子质量进行评价。<br>  第三部分 GC法建立大花黄牡丹种子指纹图谱的研究<br>  采用 GC 法建立起不同产地大花黄牡丹种子的指纹图谱。通过相对峰面积、相对保留时间对指纹图方法学进行了考察;并采用标准品对共有峰归属进行了指认。通过相似度和主成分分析发现大花黄牡丹种子与 4 个主产地油用牡丹种子中脂肪酸成分有较大差异。指纹图谱结果显示,10个产地样品相似度均大于0.999,表明不同产地大花黄牡丹种子具有良好的相似性。该方法可用于大花黄牡丹种子的质量评价。

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