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摘要目的:<br>　　神经调控被认为是神经科学研究和临床应用的重要工具，除了光遗传、磁刺激、电刺激等物理手段，低强度聚焦超声（LIFU）凭借其空间分辨率高、深入大脑深部结构且安全无创的优势引起了科研人员的兴趣，但其机制不明。在大脑皮层发育过程中，放射状胶质细胞（radial glial cells，RGCs）在中枢神经系统中作为神经祖先发挥着核心作用，自神经发生开始，来源于胚胎发育早期的神经上皮细胞（neuroepithelial cells，NECs）的放射状胶质细胞便出现在大脑的所有区域中并开始进行分化，结合了上皮特征和胶质特征，并作为了大胶质细胞（即少突胶质细胞和星形胶质细胞）和神经元的祖先。RGCs和NECs的存在在整个正常发育的大脑中提供稳定的径向结构， RGCs 的支撑功能对迁移神经元提供指导，若各种迁移分化出现障碍会导致神经元发育不良影响放射状胶质形态和稳定。当中枢神经系统发生脑损伤后，这些胶质细胞便成为了进行神经元修复的最佳来源，神经发生随着创伤或损伤而增加，保证了神经元的生存，因此放射状胶质细胞的选择性分化将影响神经活动的发生，所以，更好地掌握放射状胶质细胞的分化机制，可以为脑损伤神经元提供有利环境，为治疗中枢神经系统疾病提供新思路。目前，超声在可逆神经调控方面获得了初步研究，但其对大脑皮层胶质网络的早期分化干预还未进行探究。因此，本研究拟通过低频率的、低强度的聚焦超声（LIFU）对大脑皮层网络进行安全无创的干预，观察 LIFU 刺激对大脑皮层发育长期可塑性，对发育阶段星形胶质细胞增殖的影响及其可能的机制，为LIFU在神经调控方面的基础研究和临床应用提供线索和理论基础。<br>　　方法:<br>　　1、根据随机抽样原理将新生小鼠分为假手术组和LIFU组，每组数量相同（n=8），将刚出生的新生小鼠视作P0，出生后第1天、2天、3 天视作 P1、P2、P3；后 1 个月的小鼠视作 P1 month（P1M）。对LIFU组P1小鼠进行LIFU连续波辐照（频率650kHz，有效输出功率为0.4w，连续3天，每天5分钟）；假手术组小鼠置入LIFU声场中，不施加声波。<br>　　2、通过Western Blot法检测小鼠大脑皮层中c-Fos、NFIX、BLBP蛋白表达水平；利用组织免疫化学荧光标记观察小鼠大脑皮层c-Fos、NFIX、GFAP、BLBP、Nestin、NeuN等表达情况。<br>　　3、对假手术组和LIFU组实验小鼠进行EdU法标记，观察小鼠大脑皮层神经细胞增殖的情况。<br>　　4、将假手术组和LIFU组所有P3小鼠共同饲养至一月龄（P1M），利用旷场实验评价青少年时期小鼠在陌生环境的自主探索行为；利用高架十字迷宫实验评价青少年时期小鼠的焦虑行为。<br>　　5、通过组织免疫化学荧光标记观察假手术组和LIFU组所有P1M小鼠大脑皮层BLBP、NFIX、GFAP的表达情况。<br>　　结果:<br>　　1、与假手术组相比，LIFU最后一次刺激新生小鼠结束后1、2、3h的大脑皮层中c-Fos被大量激活（P＜0.01）。<br>　　2、与假手术组相比， LIFU 作用后 1、2、3h 的小鼠大脑皮层NFIX 蛋白表达明显增加（P＜0.01）,且皮层中 BLBP 的蛋白表达也明显增加（P＜0.05）。<br>　　3、组织免疫化学荧光染色结果显示，与假手术组相比，LIFU 组小鼠大脑皮层NFIX、BLBP、NeuN均明显增加(P＜0.05)；经LIFU处理后的青少年时期小鼠皮层 GFAP、BLBP、NFIX 也明显增加（P＜0.05）。<br>　　4、通过EdU结果显示，与假手术组相比，LIFU组小鼠大脑皮层EdU阳性细胞数量明显增加（P＜0.01）。<br>　　5、LIFU 处理新生小鼠后促进其青少年时期异常探索性行为，表现为在旷场实验分析区中的频率、累计持续时间的增加（P 均＜0.01）及潜伏期时间的缩短（P＜0.05）；在高架十字迷宫实验中在开臂、闭臂处的频率及活动时间的增加（P均＜0.01）。<br>　　6、LIFU 处理新生小鼠后促进其青少年时期大脑皮层 NFIX、GFAP、BLBP的显著增加（P＜0.05）。<br>　　结论:<br>　　1、特定频率为 650kHz 的 LIFU 辐照，可引起对新生小鼠大脑皮层的 c-Fos 的激活效应，提示超声作为一种有效的、无创的外界刺激及工具，能引起大脑神经活动的发生。<br>　　2、LIFU 辐照后，可启动小鼠大脑皮层神经细胞的增殖行为，提示超声具有促进神经细胞增殖的潜能。<br>　　3、LIFU 促进皮层细胞增殖和星形胶质细胞数量增加的这一过程，可能受到NFIX的影响，提示NFIX是一个关键的转化因子。<br>　　4、LIFU 辐照新生小鼠，可影响其青少年时期的异常探索性行为。