检索历史 清除

摘要目的：<br>　　观察TRIM8在人脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗中的表达情况及作用，并初步探究其调节脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗的机制。<br>　　方法：<br>　　1、建立人脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗模型，分别采用ELISA，2DG6P法检测炎症因子及细胞葡萄糖摄取含量的水平，并运用qRT-PCR及WB分析TRIM8与DUSP14在该模型中的表达情况。<br>　　2、调控TRIM8与DUSP14在人脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗模型中的表达后，运用ELISA，2DG6P法以及WB分别检测炎症因子，细胞葡萄糖摄取含量及胰岛素信号转导相关蛋白的活化水平。<br>　　3、调节TRIM8与DUSP14在人脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗模型中的表达后，通过WB观察MAPKs通路相关蛋白的表达水平。<br>　　4、同时抑制TRIM8与DUSP14的表达，采用ELISA，2DG6P法以及WB分别检测炎症因子，细胞葡萄糖摄取含量及胰岛素信号转导相关蛋白的活化水平。<br>　　结果：<br>　　1、ELISA结果显示炎症因子在加入LPS后升高，且细胞糖摄取含量降低，在24h时降至最低。此外TRIM8在加入LPS24h后表达水平最高，DUSP14在LPS处理24h后水平降低，因此后续实验采取LPS持续24h为最佳处理时间。<br>　　2、相较于单独的LPS处理，分别沉默TRIM8和过表达DUSP14降低了脂肪细胞炎症因子的表达，增加了脂肪细胞糖摄取含量，增强了胰岛素信号转导，改善了脂肪细胞胰岛素敏感性。反之，抑制DUSP14的表达提高了脂肪细胞炎症因子的表达，降低了脂肪细胞糖摄取含量，降低胰岛素信号转导相关蛋白的磷酸化水平，进一步损害胰岛素信号转导，加重胰岛素抵抗。<br>　　3、被LPS激活的MAPKs通路在沉默TRIM8和过表达DUSP14后JNK1/2及ERK1/2激酶的活性水平降低，而沉默DUSP14则进一步提高了二者的磷酸化水平。<br>　　4、同时抑制TRIM8及DUSP14的表达后发现，沉默TRIM8所致的炎症因子水平降低，糖摄取含量的升高以及胰岛素信号转导的改善均在沉默DUSP14后被逆转了。<br>　　结论：<br>　　TRIM8在脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗中表达升高并可通过调控MAPKs通路调节脂肪细胞炎症及胰岛素抵抗，且该作用可能还依赖DUSP14。